Characterization of immunomodulatory properties of extracellular vesicles derived from probiotic bacteria and their migration in the host
Public support
Provider
Ministry of Education, Youth and Sports
Programme
Promoting the mobility of researchers and workers in the framework of international cooperation in R&D
Call for proposals
—
Main participants
Univerzita Karlova / 1. lékařská fakulta
Contest type
M2 - International cooperation
Contract ID
-
Alternative language
Project name in Czech
Charakterizace imunomodulačních vlastností vezikulů odvozených z probiotických bakterií a studium jejich migrace v organismu
Annotation in Czech
Ověření schopnosti vezikulů získaných probiotické E. coli O83 snižovat závažnost střevních zánětů a popsání mechanistického působení těchto vezikulů. 1. Cíl vytvoření E. coli O83 exprimující fluorescenční proteiny, které budou následně přítomny ve vezikulech. Právě schopnost E. coli O83 tvořit fluorescenční proteiny nám následně umožní lépe sledovat schopnost imunitních buněk pohlcovat tyto vezikuly in vitro a v případě in vivo modelu budeme schopni lokalizovat tyto vezikuly v gastrointestinálním traktu s studovat dynamiku jejich pohlcení a přetrvávání v myších. 2. In vitro uptake vezikulů buňkami Pro lepší pochopení mechanismu, jak OMV mohou ovlivňovat funkce imunitních buněk, se zaměříme na schopnost buněk pohlcovat OMV. Budeme studovat změnu v koncentraci cytokinů a chemokinů po stimulaci/pohlcení OMV těmito buňkami/buněčnými liniemi pomocí metody ELISA a zároveň pomocí fluorescenčního mikroskopu budeme stanovovat přítomnost OMV v buňkách. 3. Možné mechanismy prospěšného působení vezikulů zahrnujících signalizaci přes klíčové receptory přirozené imunity rozpoznávající MAMP. Pro ověření klíčových drah prospěšné působení E. coli O83 a jejich vezikulů využijeme transfekované buněčné linie exprimující různé receptory pro MAMP (microbe associated molecular patterns) (např. TLR2, TLR4, TLR5, NOD2), které následně budeme inhibovat pro ověření jejich nezbytnosti pro zprostředkování prospěšného účinku E. coli O83. 4. Ověření schopnosti E. coli O83 a vezikulů získaných z bakteriální kultury E. coli O83 zabránit vzniku akutní kolitidy inukované kyselinou tribnitrobenzensulfonovou (TNBS). Po perorálním podávání E. coli O83 či vezikulů získaných ze E. coli O83 myším bude akutní kolitida indukována podáním TNBS intrarektálně. Schopnost vezikulů a E. coli O83 snižovat závažnost zánětu vyhodnocena makroskopicky (tzv. Wallace skóre), histologicky (Ameho skóre dle buněčné infiltrace) a dle míry genové exprese prozánětlivých markerů stanovené pomocí qPCR
Scientific branches
R&D category
ZV - Basic research
OECD FORD - main branch
10606 - Microbiology
OECD FORD - secondary branch
30308 - Nutrition, Dietetics
OECD FORD - another secondary branch
—
CEP - equivalent branches <br>(according to the <a href="http://www.vyzkum.cz/storage/att/E6EF7938F0E854BAE520AC119FB22E8D/Prevodnik_oboru_Frascati.pdf">converter</a>)
EE - Microbiology, virology<br>FP - Other medical fields
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 2023
Realization period - end
Dec 31, 2024
Project status
K - Ending multi-year project
Latest support payment
Feb 14, 2024
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP24-MSM-8J-R
Data delivery date
Feb 19, 2024
Finance
Total approved costs
198 thou. CZK
Public financial support
198 thou. CZK
Other public sources
0 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK