Two-dimensional capillary electromigration methods for separation, analysis and characterization of biomolecules
Project goals
A new instrumentation and methodology for two-dimensional capillary electromigration methods (2D-CE) will be developed with the aim to achieve high separability and sensitivity for analysis and characterization of biomolecules, especially peptides and proteins. A new generation 2D-CE analyzer will be composed of two in-series connected capillaries with a cross-shaped interface allowing independent filling of capillaries with variable separation media and on-line coupling of two electroseparation modes. Separated analytes will be detected by high-sensitive fluorescence or mass spectrometric detection. In the methodology area, new 2D-CE separation systems will be based on combination of orthogonal separation principles. To achieve high sensitivity and peak capacity, the concentrating effects of capillary isotachophoresis and isoelectric focusing with immobilized pH gradient will be utilized in the first dimension, followed by orthogonal modes of capillary electrophoresis in volatile sieving media, micellar electrokinetic chromatography or electrochromatography in the second dimension.
Keywords
Capillary electrophoresistwo-dimensional separationsbiomolecules
Public support
Provider
Czech Science Foundation
Programme
Standard projects
Call for proposals
Standardní projekty 17 (SGA0201300005)
Main participants
Fyziologický ústav AV ČR, v. v. i.
Ústav organické chemie a biochemie AV ČR, v. v. i.Contest type
VS - Public tender
Contract ID
13-17224S
Alternative language
Project name in Czech
Dvoudimenzionální kapilární elektromigrační metody pro separaci, analýzu a charakterizaci biomolekul
Annotation in Czech
Bude vyvinuta nová instrumentace a metodika pro dvoudimenzionální kapilární elektromigrační metody (2D-CE) s cílem získat vysokou separační účinnost a citlivost pro separaci, analýzu a charakterizaci biomolekul, zejména peptidů a bílkovin. Bude zkonstruován 2D-CE analyzátor nové generace skládající se ze dvou křemenných kapilár sériově spojených křížovým rozhraním, které umožní nezávislé plnění obou kapilár různými separačními médii a on-line spojení dvou rozdílných elektroseparačních módů. Separované analyty budou detekovány vysoce citlivou fluorescenční nebo hmotnostně spektrometrickou detekcí. V metodické oblasti budou vyvinuty nové 2D-CE systémy založené na kombinaci ortogonálních separačních principů. Pro dosažení vysoké citlivosti i píkové kapacity budou v první dimenzi využívány koncentrační a fokusační efekty kapilární izotachoforézy a izoelektrické fokusace s imobilizovaným pH gradientem, jež budou ve druhé dimenzi následovány ortogonálními módy – zónovou elektroforézou ve volatilních sítovacích médiích, micelární elektrokinetickou chromatografií nebo elektrochromatografií.
Scientific branches
R&D category
ZV - Basic research
CEP classification - main branch
CB - Analytical chemistry, separation
CEP - secondary branch
CE - Biochemistry
CEP - another secondary branch
CF - Physical chemistry and theoretical chemistry
10403 - Physical chemistry
10406 - Analytical chemistry
10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
Completed project evaluation
Provider evaluation
V - Vynikající výsledky projektu (s mezinárodním významem atd.)
Project results evaluation
The investigators developed new instrumentation and methodology of high-performance capillary electromigration methods, zone and affinity electrophoresis, isotachophoresis, electrokinetic chromatography and electrochromatography for analyses and physicochemical characterization of various biologically important peptides, proteins, amino acids, nucleotides, nucleosides and functional molecules.
Solution timeline
Realization period - beginning
Feb 1, 2013
Realization period - end
Dec 31, 2015
Project status
U - Finished project
Latest support payment
Apr 20, 2015
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP16-GA0-GA-U/01:1
Data delivery date
Sep 25, 2017
Finance
Total approved costs
5,922 thou. CZK
Public financial support
5,922 thou. CZK
Other public sources
0 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK
Recognised costs
5 922 CZK thou.
Public support
5 922 CZK thou.
0%
Provider
Czech Science Foundation
CEP
CB - Analytical chemistry, separation
Solution period
01. 02. 2013 - 31. 12. 2015