Reconstitution of mitochondrial transport system in vitro
Project goals
Mitochondrial trafficking is essential for a number of biological process, such as the maintenance of neuronal function. Components of the mitochondrial motor-adaptor complex have been recently identified, but the precise composition and the molecular mechanisms underlying the function of the complex are not known. In this project, we will rigorously characterise this complex using a bottom up approach, starting from individual components expressed as recombinant proteins and building up an increasingly complex system. We will use a combination of molecular-biology, biophysical and biochemical approaches to reconstitute and observe the movement of the transport complex along microtubules in vitro, using artificial cargo as well as mitochondria isolated from various sources and quantitatively correlating the composition of the complex with its function. This research will elucidate the molecular mechanisms underlying the mitochondrial transport, and open up the possibility to further analyse the mechanisms governing the regulation of mitochondrial trafficking in a detailed manner.
Keywords
cytoskeletonmicrotubulesmitochondrial transportkinesindyneinadaptor proteinsmiromiltonTIRF
Public support
Provider
Czech Science Foundation
Programme
Standard projects
Call for proposals
Standardní projekty 22 (SGA0201800001)
Main participants
Biotechnologický ústav AV ČR, v. v. i.
Contest type
VS - Public tender
Contract ID
18-08304S
Alternative language
Project name in Czech
In vitro rekonstituce mitochondriálního transportního komplexu
Annotation in Czech
Mitochondriální transport je nezbytný pro řadu biologických procesů, jako na příklad zajištění bezchybné neuronové aktivity. Součásti mitochondriálního transportního systému byly identifikovány v nedávné době, avšak přesné složení tohoto transportního systému a molekulární mechanizmus jeho fungování nejsou známy. V navrhovaném projektu bude tento transportní systém sestaven in vitro z jednotlivých komponent, které budou exprimovány ve formě rekombinantních proteinů, a tímto rekonstituovaným transportním systémem bude in vitro transportován jak umělý náklad, tak izolované mitochondrie. Za použití kombinace molekulárně-biologických, biofyzikálních a biochemických metod bude sledován pohyb takto rekonstituovaného transportního systému po mikrotubulech a jeho složení bude kvantitativně korelováno s jeho funkcí. Tento výzkum objasní molekulární mechanizmy, jež tvoří základ transportu mitochondrií v buňkách a otevře další možnosti detailního výzkumu regulace toho transportu.
Scientific branches
R&D category
ZV - Basic research
OECD FORD - main branch
10610 - Biophysics
OECD FORD - secondary branch
10602 - Biology (theoretical, mathematical, thermal, cryobiology, biological rhythm), Evolutionary biology
OECD FORD - another secondary branch
10608 - Biochemistry and molecular biology
BO - Biophysics
CE - Biochemistry
EA - Morphology and cytology
EB - Genetics and molecular biology
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 2018
Realization period - end
Dec 31, 2020
Project status
—
Latest support payment
Apr 24, 2020
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP21-GA0-GA-R/17:1
Data delivery date
Feb 26, 2021
Finance
Total approved costs
6,258 thou. CZK
Public financial support
6,258 thou. CZK
Other public sources
0 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK
Basic information
Recognised costs
6 258 CZK thou.
Public support
6 258 CZK thou.
100%
Provider
Czech Science Foundation
OECD FORD
Biophysics
Solution period
01. 01. 2018 - 31. 12. 2020