Analysis of interaction of protein acatyltransferase CyaC and acyl domain of Adenylate Cyclase Toxin (ACT) from Bordetella pertussis using two-hybrid assay
Public support
Provider
Czech Science Foundation
Programme
Standard projects
Call for proposals
Standardní projekty 1 (SGA02002GA-ST)
Main participants
Mikrobiologický ústav AV ČR, v. v. i.
Contest type
VS - Public tender
Contract ID
—
Alternative language
Project name in Czech
Analýza interakce protein acetyltransferasy CyaC s acylační doménou Adenylát Cyklásového Toxinu (ACT) z Bordetella pertussis pomocí "two-hybrid" metody
Annotation in Czech
Adenylát cyklásový toxin (ACT) je syntetizován v neaktivní formě (pro ACT) a pro jeho aktivaci je nezbytná postranslační úprava - acylace epsilon-aminové skupiny lysinu v pozici 983 popř. 860. Maturovaný toxin pak vykazuje invazivní adenylát cyklasovou aktivitu (konverze ATP na cAMP) a hemolytickou (pór tvořící) aktivitu. Proces acylace probíhá za účasti acyltransferasy CyaC, která je syntetizována současně s proACT, přičemž donorem acylové skupiny je acyl-ACP (acyl-acyl carrier protein). V prvním kroktohoto procesu dochází k nekovaletní vazbě CyaC-acyl-ACP, což vyvolá konformační změnu v molekule CyaC a vytvoření vazebného místa pro substrát proACT. Ve druhém kroku proACT interaguje s CyaC-acyl-ACP za vzniku ternárního komplexu. Nově zkonstruovaný "two hybrid" systém umožňuje studovat in vivo interakce protein-protein v adenylát cykláse deficientním kmeni Escherichia coli. Bude připravena řada mutant části ACT obsahující acylační doménu (400-1706 AK) se substituovanými aminokyselinovými zbytky Lys
Scientific branches
R&D category
—
CEP classification - main branch
EB - Genetics and molecular biology
CEP - secondary branch
EC - Immunology
CEP - another secondary branch
EE - Microbiology, virology
OECD FORD - equivalent branches <br>(according to the <a href="http://www.vyzkum.cz/storage/att/E6EF7938F0E854BAE520AC119FB22E8D/Prevodnik_oboru_Frascati.pdf">converter</a>)
10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)<br>10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)<br>10605 - Developmental biology<br>10606 - Microbiology<br>10607 - Virology<br>10608 - Biochemistry and molecular biology<br>10609 - Biochemical research methods<br>30101 - Human genetics<br>30102 - Immunology
Completed project evaluation
Provider evaluation
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Project results evaluation
Projekt byl předčasně ukončen na žádost řešitelky (odchod z pracoviště). Přes nenaplnění dvou dílčích cílů lze projekt hodnotit jako úspěšně splněný s podstatným vědeckým přínosem. Výsledky řešení projektu byly prezentovány na dvou konferencích a jsou př
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 2000
Realization period - end
Jan 1, 2003
Project status
S - Stopped (prematurely terminated) multi-year project
Latest support payment
—
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP/2002/GA0/GA02GA/U/N/7:3
Data delivery date
Apr 1, 2003
Finance
Total approved costs
351 thou. CZK
Public financial support
288 thou. CZK
Other public sources
84 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK