Isozyme composition and activity of oxidative pentose phosphate pathway PVY-RNA replication in susceptible, tolerant and resistant tobacco
Project goals
The proposed project is aimed to characterisation and quantification of the relationships between viral multiplication and enhanced activity of pentosephosphate cycle (metabolic pathway for biosynthesis of viral RNA), in the susceptible, tolerant and resistant cultivars of tobacco and in the transformed tobacco expressing gene of SMV coat protein that exhibits protection against potyviruses. The final results would allow us validation of correlative relationships between virus multiplication and activities of enzymes of pentosephosphate cycle, thus quantitatively demonstrating the degree of cultivar resistance to virus multiplication. Virus content will be determinate quantitatively (DAS-ELISA, PAGE of virus RNA), the activities of enzymes will be estimated by determination of specific activities of isoenzymes from cytosol and chloroplasts in protoplasts prepared from healthy and infected leaves using the methods of differential centrifugation and electrophoresis.
Keywords
Public support
Provider
Czech Science Foundation
Programme
Standard projects
Call for proposals
—
Main participants
Ústav experimentální botaniky AV ČR, v. v. i.
Contest type
—
Contract ID
—
Alternative language
Project name in Czech
Aktivita a složení isozymů oxidativního pentosofosfátového cyklu při replikaci PVY-RNA u vnímavých, torelantních a resistentních kultivarů tabáku
Annotation in Czech
Cílem navrhovaného projektu je charakterizace a kvantifikace vztahů mezi reprodukcí viru v pletivech a zvýšenou aktivitou oxydativního pentosofosfátového cyklu (jedné z cest biosyntézy virové RNA), u vnímavých, tolerantních a rezistentních kultivarů tabáku, a jeho rezistentních transgenních linií exprimujících gen pro syntézu bílkovinného obalu viru. Výsledky by měly prokázat platnost korelačních vztahů mezi obsahem viru a zvýšenými aktivitami enzymů cyklu, a tím definovat stupeň rezistence kultivaru kreprodukci viru kvantitativně. Obsah viru by byl stanovován kvantitativně jak metodou DAS - ELISA, tak jako obsah virové RNA pomocí elektroforetických metod, aktivity enzymů cyklu jako specifické aktivity jejich separovaných isoenzymů chloroplastů a cytosolu, izolovaných ze zdravých a infikovaných protoplastů centrifugačními a elektroforetickými metodami.
Scientific branches
R&D category
—
CEP classification - main branch
EB - Genetics and molecular biology
CEP - secondary branch
CE - Biochemistry
CEP - another secondary branch
ED - Physiology
10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)
10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)
10605 - Developmental biology
10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
30101 - Human genetics
30105 - Physiology (including cytology)
Completed project evaluation
Provider evaluation
V - Vynikající výsledky projektu (s mezinárodním významem atd.)
Project results evaluation
Projekt přispěl k poznání regulačních mechanismů a subcelulární lokalizace enzymů vyvolaných infekcí Y viru bramboru v kultivarech tabáku (modelová rostlina) s rozdílným stupněm rezistence. Studována byla i korelace mezi aktivitou ribonukleáz a biosyntéz
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 1996
Realization period - end
Jan 1, 1998
Project status
U - Finished project
Latest support payment
—
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP/1999/GA0/GA09GA/V/6:6
Data delivery date
—
Finance
Total approved costs
2,045 thou. CZK
Public financial support
1,146 thou. CZK
Other public sources
0 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK
Basic information
Recognised costs
2 045 CZK thou.
Public support
1 146 CZK thou.
56%
Provider
Czech Science Foundation
CEP
EB - Genetics and molecular biology
Solution period
01. 01. 1996 - 01. 01. 1998