MEK kinase inhibitor UO126 - a new tool for modulation of the p42/44 mAP kinase activity in mammalian germ cells
Project goals
The experiments proposed here will determine complementary role of cdc2 kinase and MAPK during maturation and activation of mmamalian oocytes. Especially, the role of p42/44 mitogen-activated protein kinase (MAPK) in two important checkpoints of meiosiswill be addressed. Germinal vesicle stage and metaphase II mouse and porcine oocytes, which represent two substantially different models of mammalian oocytes, vill be cultured in medium enriched with MAPK activating kinase (MEK) inhibitor UO126. The effect of the MEK inhibition upon progression of meiotic maturation and oocyte activation will be evaluated using morphological (phase-contrast and immunofluorescent microscopy) and biochemical methods (detection of the activity and activation of cdc2 kinase, MAPK and MEK using Western blotting and kinase assay methods). This approach will bring a new insight into specific kinase activities required for nuclear envelope disintegration during germinal vesicle breakdown and nuclear envelope formation
Keywords
Public support
Provider
Czech Science Foundation
Programme
Standard projects
Call for proposals
Standardní projekty 1 (SGA02002GA-ST)
Main participants
Ústav živočišné fyziologie a genetiky AV ČR, v. v. i.
Contest type
VS - Public tender
Contract ID
—
Alternative language
Project name in Czech
UO126-inhibitor MEK protein kinázy jako nový nástroj pro modulaci aktivity p42/44 MAP kinázy v zárodečných buňkách savců
Annotation in Czech
Navrhovaný projekt objasní roli cdc2 kinázy a MAP kinázy během zrání a aktivace oocytů savců.Dále bude pro experimenty s přenosy jader buněk savců vyvinut nový postup aktivace oocytů. Bude sledována role p42/44 mitogeny aktivované protein kinázy (MAPK) vdvou důležitých fázích meiotického dělení. Myší a prasečí oocyty ve stádiu zárodečného váčku a metafáze II budou kultivovány v médiu obsahujícím látku UO126 - inhibitor MAPK aktivující kinázy (MEK). Bude vyhodnocen vliv inhibice MEK na průběh meiotickéhozrání a aktivace oocytů. Za tímto účelem bude provedeno morfologické hodnocení oocytů (optická a fluorescenční mikroskopie) a biochemická analýza extraktů oocytů (test aktivity a aktivace cdc2 kinázy, MAPK a MEK) pomocí metod immunoblotingu a kinázovýchzkoušek. Potlačení aktivace MAPK v oocytech jako důsledek inhibice aktivity MEK umožní analyzovat roli MAPK při rozpadu zárodečného váčku oocytů a při znovuzahájení meiotického dělení. Inhibice aktivity MAPK přinese nový pohled na význam zrání
Scientific branches
Completed project evaluation
Provider evaluation
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Project results evaluation
Záměrem projektu bylo objasnit úlohu cdc2 kinázy a MAP kinázy během zrání a aktivace savčích oocytů a vyvinout nový systém aktivace oocytů použitelný v experimentech s přenosy jader. Jako nástroj k dosažení těchto cílů byl zvolen specifický inhibitor MEK
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 2000
Realization period - end
Jan 1, 2002
Project status
U - Finished project
Latest support payment
—
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP/2003/GA0/GA03GA/U/N/9:7
Data delivery date
May 19, 2008
Finance
Total approved costs
2,265 thou. CZK
Public financial support
1,886 thou. CZK
Other public sources
628 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK
Basic information
Recognised costs
2 265 CZK thou.
Public support
1 886 CZK thou.
83%
Provider
Czech Science Foundation
CEP
GI - Farm animal breeding and farm animal pedigree breeding
Solution period
01. 01. 2000 - 01. 01. 2002