The role of hydrophobic plasma membrane interior in DOR regulation of trimeric G protein activity
Public support
Provider
Czech Science Foundation
Programme
Standard projects
Call for proposals
Standardní projekty 15 (SGA02012GA-ST)
Main participants
Fyziologický ústav AV ČR, v. v. i.<br>Ústav fyzikální chemie J. Heyrovského AV ČR, v. v. i.
Contest type
VS - Public tender
Contract ID
P207-12-0919
Alternative language
Project name in Czech
Úloha hydrofobní zóny plasmatické membrány v regulaci funkční aktivity trimerních G proteinů receptorem pro opioidy typu delta
Annotation in Czech
Současná představa o úloze organizace buněčné membrány ve funkčním spřažení mezi receptorem pro opioidy typu delta (DOR) a G proteiny je nejasná. Deplece cholesterolu vede ke snížení schopnosti DOR aktivovat G proteiny, vazebné parametry DOR se však nemění. Cílem projektu je podrobná korelace mezi strukturou a dynamikou buněčné membrány, která bude vyšetřována s pomocí fluoresceční spektroskopie a mikroskopie a funkčním stavem DOR-stimulované signální kaskády (vazba ligandu na receptor, vazba [35S]GTP&gamma;S, vysoko-afinní GTPasa, adenyl cyklasa). Použijeme intaktní buňky a isolované plasmatické membrány a jejich části (membránové domény), které připravíme z mozku a modelových buněčných linií exprimujících DOR-Gi1&alpha;, DOR a jeho fluoreskující analoga jako je DOR-YFP. Plasmatické membrány budou rekonstituovány do modelových membrán, např. do obřích unilamelárních váčků (GUVs). Pomocí pokročilých technik fluorescenční mikroskopie (např. rastrovací korelační spektroskopie (RICS), FLIM) bude sledováno lipidové uspořádání a mobilita jak fluorescenčně značených lipidů tak DOR-YFP.
Scientific branches
R&D category
ZV - Basic research
CEP classification - main branch
CE - Biochemistry
CEP - secondary branch
BO - Biophysics
CEP - another secondary branch
ED - Physiology
OECD FORD - equivalent branches <br>(according to the <a href="http://www.vyzkum.cz/storage/att/E6EF7938F0E854BAE520AC119FB22E8D/Prevodnik_oboru_Frascati.pdf">converter</a>)
10608 - Biochemistry and molecular biology<br>10609 - Biochemical research methods<br>10610 - Biophysics<br>30105 - Physiology (including cytology)
Completed project evaluation
Provider evaluation
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Project results evaluation
The results contributed to the more detailed knowledge of the ability of the body to return to the physiological state after morphine long-term administration. The number of students engaged could not be determined. The results were published in 13 papers. Minor changes in funds from the original plan have been justified and in accordance with the rules of the grant agency.
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 2012
Realization period - end
Dec 31, 2016
Project status
U - Finished project
Latest support payment
Apr 12, 2016
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP17-GA0-GA-U/03:1
Data delivery date
Jun 28, 2017
Finance
Total approved costs
9,965 thou. CZK
Public financial support
9,965 thou. CZK
Other public sources
0 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK