Polymer supports cintaining immobilized metal ions for protein purification
Project goals
The immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC) of monoclonal antibodies (mAbs) and transgenic proteins are stdied. New hydrophylic polymer supports modified with various chelating ligands and coordinated with transition or hard Lewis metal ionswill be prepared. The bead-supports willbe compared with surface modified membranes for a study of a correlation between the accessibility of chelating ligands to protein binding and their sorption selectivity and elution kinetics. The structure of thecopolymers synthesized on the basis of 2-hydroxymethalmethacrylate (HEMA) will differ in porosity, concentration and distribution of reactive groups binding the chelating ligands. The chemical structure of the chelating ligands and nature of immobilizedmetal ions will be varied with the aim a study of binding sites on the surface of protein molecules, an enhancing sorption selectivity of the target proteins and an optimization of IMAC for purificarion of various mAb subclasses.
Keywords
Poly(ethylenedimethacrylate-co-diethyleneglycol methacrylate or glydcidyl methacrylate)ehtylenediaminotriacetic acidiminodiacetic acidhydroxyquinolinecarboxypyridineNi2+, Cu2+, Fe3+ complexesspecific immunoglobulinschitinaseIMAC
Public support
Provider
Academy of Sciences of the Czech Republic
Programme
Grants of distinctly investigative character focused on the sphere of research pursued at present particularly in the Academy of Sciences of the Czech Republic
Call for proposals
—
Main participants
Ústav makromolekulární chemie AV ČR, v. v. i.
Contest type
VS - Public tender
Contract ID
—
Alternative language
Project name in Czech
Polymerní nosiče obsahující imobilizované kovové ionty pro čištění bílkovin
Annotation in Czech
Budou připraveny nové hydrofilní polymerní nosiče (porézní částice a membrány) modifikované různými chelatačními ligandy a koordinované s různými přechodovými a Lewisovými kovovými ionty.Korelace mezi kinetikou eluce a dostupností chelatujících ligand pro vázání bílkovin a jejich sorpční selektivitu bude provedena porovnáním polymerních nosičů ve formě částic a povrchově modifikovaných membrán. Syntetizované nosiče na bázi kopolymerů 2-hydroxyethylmetakrylátu (HEMA) budou charakterizovány proměnnou porozitou a koncentrací i distribucí reakčních skupin.Chemická struktura chelatačních ligand a typ imobilizovaného kovového iontu se budou měnit s cílem 1. studia vazebných míst na povrchu molekul bílkovin, 2. zvýšením sorpční selektivity cílových bílkovin a3. optimalizace IMYC pro čištění různých podtříd mAbs a transgenních bílkovin. Struktura polymerů a chelatačních ligand bude vyhodnocena spektroskopickými metodami, adsorpcí plynů, metodou rtuťové porozimetrie a elektronovou mikroskopií.
Scientific branches
Completed project evaluation
Provider evaluation
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Project results evaluation
Byly připraveny nové porézní a neporézní chelatující nosiče ve formě částic a membrán z polyesterů kyseliny metakrylové. Byly studovány a optimalizovány podmínky IMAC pro úspěšné separace monoklonálních protilátek a chitináz z přírodních zdrojů.
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 1999
Realization period - end
Jan 1, 2001
Project status
U - Finished project
Latest support payment
—
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP/2002/AV0/AV02IA/U/N/7:3
Data delivery date
Jan 15, 2007
Finance
Total approved costs
3,601 thou. CZK
Public financial support
1,054 thou. CZK
Other public sources
2,547 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK
Basic information
Recognised costs
3 601 CZK thou.
Public support
1 054 CZK thou.
29%
Provider
Academy of Sciences of the Czech Republic
CEP
CD - Macromolecular chemistry
Solution period
01. 01. 1999 - 01. 01. 2001