Treatment of spinal cord injury via targeted inhibition of the inflammasome with gene therapy stimulation of motor pathway axon regeneration

Provider

Ministry of Education, Youth and Sports

Programme

—

Call for proposals

SMSM2025LU001

Main participants

Ústav experimentální medicíny AV ČR, v. v. i.

Contest type

VS - Public tender

Contract ID

-

Project name in Czech

Léčba míšního poranění cílenou inhibicí inflamasomu se stimulací regenerace axonů motorické dráhy genovou terapií

Annotation in Czech

1. Úprava povrchu a obohacení obsahu exosomů odvozených z neurálních prekurzorů SPC-01 k zajištění jejich lepšího doručení do místa poranění míchy a inhibici zánětlivé signalizace. 2. Validace upravených exosomů v modelu míšního poranění potkana 3. Kombinace upravených exosomů modifikovaných peptidem CAQK a obohacených o mlrp3-siRNA s genovou terapií aktivovavé PI3Kdelta Prvním cílem projektu je úspěšná úprava a obohacení exosomů. Provedeme jejich charakterizaci a testy stability po dobu až dvou týdnů při 4C/80°C s následnou validací hromadění CAQK-EV v CSPG prostředí v in vitro buněčné kultuře SPiN anebo kultuře disociovaných DRG neuronů. Následně potvrdímě účinek exosomů na inhibici inflamasomu v kultuře SPiN a/nebo v organotypických míšních řezech. Dalším cílem je otestovat akumulaci modifikovaných exosomů in vivo v modelu míšní léze potkana, kterému budou vezikly opakovaně podány po dobu 5 dnů. Po 7 dnech budeme detekovat jejich množství v oblasti léze, kterou také podrobíme analýzám inflamasomu, buněčné smrti, produkce prozánětlivých faktorů a aktivace astrocytů. Závěrečným cílem projektu je rapidní a zlepšená regenerace kortikospinálních motorických axonů po poranění míchy u dospělých potkanů. Toho bude dosaženo dvoustupňovou terapií a) upravenými exosomy v prvních 5 dnech po míšním poranění a následným podáním b) genové terapie modifikované PI3Kdelta do motorické kůry. Tato forma PI3Kdelta není pro svou aktivaci závislá na extracelulárních ligandech a proto je pravděpodobné, že bude stimulovat ještě robustnější regeneraci axonů než její nemodifikovaná varianta. Funkční zlepšení bude stanoveno analýzou tkáně i behaviorálně.

R&D category

ZV - Basic research

OECD FORD - main branch

30103 - Neurosciences (including psychophysiology)

OECD FORD - secondary branch

30401 - Health-related biotechnology

OECD FORD - another secondary branch

20601 - Medical engineering

CEP - equivalent branches <br>(according to the <a href="http://www.vyzkum.cz/storage/att/E6EF7938F0E854BAE520AC119FB22E8D/Prevodnik_oboru_Frascati.pdf">converter</a>)

EI - Biotechnology and bionics<br>FH - Neurology, neuro-surgery, nuero-sciences<br>FS - Medical facilities, apparatus and equipment

Realization period - beginning

Mar 1, 2025

Realization period - end

Dec 31, 2028

Project status

Z - Beginning multi-year project

Latest support payment

—

Confidentiality

C - Předmět řešení projektu podléhá obchodnímu tajemství (§ 504 Občanského zákoníku), ale název projektu, cíle projektu a u ukončeného nebo zastaveného projektu zhodnocení výsledku řešení projektu (údaje P03, P04, P15, P19, P29, PN8) dodané do CEP, jsou upraveny tak, aby byly zveřejnitelné.

Data delivery code

CEP25-MSM-LU-R

Data delivery date

Feb 11, 2025

Total approved costs

8,502 thou. CZK

Public financial support

8,502 thou. CZK

Other public sources

0 thou. CZK

Non public and foreign sources

0 thou. CZK