Production process of the set to determine minimum inhibitory concentrations of antimicrobials in bacterial anaerobic pathogens of livestock animals

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00027162%3A_____%2F17%3AN0000136" target="_blank" >RIV/00027162:_____/17:N0000136 - isvavai.cz</a>

Result on the web

<a href="https://www.vri.cz/userfiles/file/Overene_technologie/2017/VUVeL-Overena_technologie-4797-Nedbalcova-Vyr_setu_ke_stanov_minimal_inhib_koncentr_antimikrob_latek_u_bakterial_anaerob_patogen_hosp_zvirat.pdf" target="_blank" >https://www.vri.cz/userfiles/file/Overene_technologie/2017/VUVeL-Overena_technologie-4797-Nedbalcova-Vyr_setu_ke_stanov_minimal_inhib_koncentr_antimikrob_latek_u_bakterial_anaerob_patogen_hosp_zvirat.pdf</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Výroba setu ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u bakteriálních anaerobních patogenů hospodářských zvířat

Original language description

Ověřená technologie popisuje detailně výrobu, kontrolu kvality a způsob použití setu ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antibiotik u anaerobních patogenů hospodářských zvířat. Umožňuje laboratorní in vitro stanovení citlivosti/rezistence klinických izolátů anaerobních patogenů hospodářských zvířat, zejména klostridií, na základě stanovení minimálních inhibičních koncentrací (MIC) mikrodiluční metodou ke 12 antibiotikům (ampicilin, penicilin, ceftiofur, vankomycin, klindamycin, meropenem, tigecyklin, enrofloxacin, tiamulin, tysosin, florfenikol a kombinace trimethoprimu a sulfamethoxazolu). Jedná se o mikrotitrační destičku s 96 jamkami - 12 sloupců (1-12) a 8 řádků (A-H). Ve sloupcích je v růstovém médiu naředěno dvanáct antibiotik používaných k léčbě infekcí hospodářských zvířat způsobených anaerobními patogeny v objemu 200 µl, u jedenácti antibiotik (sloupce 1-11) je na destičce 8 ředění (řádky A-H) a u jednoho antibiotika (sloupec 12) je 7 ředění (řádky B-H) a v řádku A je jamka s 200 µl média bez antibiotika sloužící jako pozitivní kontrola růstu testovaných bakterií. Počáteční koncentrace jednotlivých antibiotik na destičce jsou rozdílné a jsou voleny tak, aby hodnoty MIC vyšetřovaných bakterií zahrnovaly rozmezí breakpointů citlivosti/rezistence podle závazných mezinárodních metodik Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) a European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) rozmezí hodnot MIC bakteriálních kmenů povinně testovaných v rámci kontroly kvality, které je pro jednotlivá antibiotika rozdílné. Pro anaerobní bakterie je použito růstové médium Brucella Broth obohacené heminem a vitamínem K1 (CLSI, EUCAST). Ze zásobních koncentrací antimikrobiálních látek 10 000 mg/L se připravují pracovní koncentrace antimikrobik 1 000 mg/L (K 1 000), 10 mg/L (K 10) nebo 1 mg/L (K 1) ředěním ve sterilní destilované vodě, ze které se připraví finální koncentrace antimikrobik v objemu 25 ml do 96 velkých zkumavek. Finální koncentrace antimikrobik se připravují ředěním v růstovém médiu a jsou aplikovány do příslušných jamek na destičce v objemu 0,1 ml. Plnění jednotlivých jamek destiček z velkých zkumavek je prováděno laboratorním rozplňovacím přístrojem DYNATECH Laboratories 1036 Quick spenze IIE dle návodu výrobce. Rozplněné desky opatřené víčkem jsou baleny po 5 kusech do smrštitelné fólie a uloženy v -80 °C. Veškeré práce na přípravě a výrobě MIC setů (příprava roztoků antibiotik a jejich aplikace na destičky) probíhají v prostorách se zajištěnou filtrací vzduchu (třída čistoty A). Kontrola kvality výroby se provádí stanovením MIC antimikrobiálních látek u referenčního kmene Clostridium difficile ATCC 700057 a provedením zkoušky sterility bezprostředně po výrobě a dále u jednotlivých šarží v týdenních intervalech až do exspirace výrobku – 6 měsíců ode dne výroby.

Czech name

Výroba setu ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u bakteriálních anaerobních patogenů hospodářských zvířat

Czech description

Ověřená technologie popisuje detailně výrobu, kontrolu kvality a způsob použití setu ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antibiotik u anaerobních patogenů hospodářských zvířat. Umožňuje laboratorní in vitro stanovení citlivosti/rezistence klinických izolátů anaerobních patogenů hospodářských zvířat, zejména klostridií, na základě stanovení minimálních inhibičních koncentrací (MIC) mikrodiluční metodou ke 12 antibiotikům (ampicilin, penicilin, ceftiofur, vankomycin, klindamycin, meropenem, tigecyklin, enrofloxacin, tiamulin, tysosin, florfenikol a kombinace trimethoprimu a sulfamethoxazolu). Jedná se o mikrotitrační destičku s 96 jamkami - 12 sloupců (1-12) a 8 řádků (A-H). Ve sloupcích je v růstovém médiu naředěno dvanáct antibiotik používaných k léčbě infekcí hospodářských zvířat způsobených anaerobními patogeny v objemu 200 µl, u jedenácti antibiotik (sloupce 1-11) je na destičce 8 ředění (řádky A-H) a u jednoho antibiotika (sloupec 12) je 7 ředění (řádky B-H) a v řádku A je jamka s 200 µl média bez antibiotika sloužící jako pozitivní kontrola růstu testovaných bakterií. Počáteční koncentrace jednotlivých antibiotik na destičce jsou rozdílné a jsou voleny tak, aby hodnoty MIC vyšetřovaných bakterií zahrnovaly rozmezí breakpointů citlivosti/rezistence podle závazných mezinárodních metodik Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) a European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) rozmezí hodnot MIC bakteriálních kmenů povinně testovaných v rámci kontroly kvality, které je pro jednotlivá antibiotika rozdílné. Pro anaerobní bakterie je použito růstové médium Brucella Broth obohacené heminem a vitamínem K1 (CLSI, EUCAST). Ze zásobních koncentrací antimikrobiálních látek 10 000 mg/L se připravují pracovní koncentrace antimikrobik 1 000 mg/L (K 1 000), 10 mg/L (K 10) nebo 1 mg/L (K 1) ředěním ve sterilní destilované vodě, ze které se připraví finální koncentrace antimikrobik v objemu 25 ml do 96 velkých zkumavek. Finální koncentrace antimikrobik se připravují ředěním v růstovém médiu a jsou aplikovány do příslušných jamek na destičce v objemu 0,1 ml. Plnění jednotlivých jamek destiček z velkých zkumavek je prováděno laboratorním rozplňovacím přístrojem DYNATECH Laboratories 1036 Quick spenze IIE dle návodu výrobce. Rozplněné desky opatřené víčkem jsou baleny po 5 kusech do smrštitelné fólie a uloženy v -80 °C. Veškeré práce na přípravě a výrobě MIC setů (příprava roztoků antibiotik a jejich aplikace na destičky) probíhají v prostorách se zajištěnou filtrací vzduchu (třída čistoty A). Kontrola kvality výroby se provádí stanovením MIC antimikrobiálních látek u referenčního kmene Clostridium difficile ATCC 700057 a provedením zkoušky sterility bezprostředně po výrobě a dále u jednotlivých šarží v týdenních intervalech až do exspirace výrobku – 6 měsíců ode dne výroby.

Type

Z_tech - Verified technology

CEP classification

—

OECD FORD branch

40301 - Veterinary science

Project

Result was created during the realization of more than one project. More information in the Projects tab.

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Publication year

2017

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Internal product ID

OT - Set na stanovení MIC – anaerobní bakterie

Numerical identification

—

Technical parameters

Funkčnost výrobku byla ověřena formou pravidelného týdenního testování a kontrolou kvality vybraných vyrobených šarží. Kontrola kvality byla prováděna testováním kontrolního kmene Clostridium difficile ATCC 700057, který je přesně definován a jeho hodnoty MIC k antimikrobiálním látkám jsou uvedeny v laboratorních standardech CLSI a EUCAST. Hodnoty MIC u jednotlivých antimikrobik musí být v rozmezí definovaných hodnot MIC dle CLSI a EUCAST. Z průběhu kontrol byl zpracován Protokol o ověření technologie, nezávislý ověřovatel – LabMediaServis s.r.o.

Economical parameters

Ekonomické přínosy využívání výsledku lze rozdělit minimálně na dvě oblasti – zisk diagnostických laboratoří prováděním stanovení citlivosti/rezistence anaerobních bakterií k antibiotikům a ekonomický přínos pro chovatele hospodářských zvířat. Ekonomický přínos pro laboratoře bude představovat zisk z provedených vyšetření. Za předpokladu vyšetření v jedné laboratoři cca 500 vzorků ročně při ceně za jedno vyšetření kolem 500,- Kč, by se zisk 20 % z tržeb mohl pohybovat kolem 50 tis. pro jednu laboratoř. Dalším uživatelům výsledků vyšetření - chovatelům hospodářských zvířat se sníží zlepšením diagnostiky ekonomické náklady na léčbu a prevenci onemocnění a zvýší se tržby za prodej zdravotně nezávadných kvalitních potravin a surovin živočišného původu. Přesné vyčíslení přínosů chovatelům není možné, záleží vždy na zdravotní situaci a způsobu managementu v jednotlivých chovech.

Application category by cost

—

Owner IČO

00027162

Owner name

Výzkumný ústav veterinárního lékařství, v. v. i.

Owner country

CZ - CZECH REPUBLIC

Usage type

N - Využití výsledku jiným subjektem je možné bez nabytí licence (výsledek není licencován)

Licence fee requirement

—

Web page

https://www.vri.cz/userfiles/file/Overene_technologie/2017/VUVeL-Overena_technologie-4797-Nedbalcova-Vyr_setu_ke_stanov_minimal_inhib_koncentr_antimikrob_latek_u_bakterial_anaerob_patogen_hosp_zvirat.pdf