Production process of the set to determine minimum inhibitory concentrations of antimicrobials in gramnegative bacteria – 2nd series

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00027162%3A_____%2F17%3AN0000169" target="_blank" >RIV/00027162:_____/17:N0000169 - isvavai.cz</a>

Result on the web

<a href="https://www.vri.cz/userfiles/file/Overene_technologie/2017/VUVeL-Overena_technologie-4784-Nedbalcova-Vyr_setu_ke_stanov_minimal_inhib_koncentr_antimikrob_latek_u_gramnegativ_bakt-II.rada.pdf" target="_blank" >https://www.vri.cz/userfiles/file/Overene_technologie/2017/VUVeL-Overena_technologie-4784-Nedbalcova-Vyr_setu_ke_stanov_minimal_inhib_koncentr_antimikrob_latek_u_gramnegativ_bakt-II.rada.pdf</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Výroba setu ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u gramnegativních bakterií – II. řada

Original language description

Ověřená technologie popisuje detailně výrobu, kontrolu kvality a způsob použití setu ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antibiotik u gramnegativních bakterií. Umožňuje laboratorní in vitro stanovení citlivosti/rezistence klinických izolátů – humánních patogenů - gramnegativních bakterií především rodů Enterobacteriaceae spp. a Haemophilus spp.na základě stanovení minimálních inhibičních koncentrací (MIC) mikrodiluční metodou ke 12 antibiotikům (amikacin, piperacilin v kombinaci s tazobaktamem, cefoperazon, cefotaxim, ceftazidim, cefepim, cefoperazon v kombinaci se sulbaktamem, meropenem, ciprofloxacin, tigecyklin, tobramycin, piperacilin). Jedná se o mikrotitrační destičku s 96 jamkami - 12 sloupců (1-12) a 8 řádků (A-H). Ve sloupcích je v růstovém médiu naředěno dvanáct antibiotik používaných k léčbě infekcí lidí způsobených enterobakteriemi nebo hemofily v objemu 100 µl, u jedenácti antibiotik (sloupce 1-11) je na destičce 8 ředění (řádky A-H) a u jednoho antibiotika (sloupec 12) je 7 ředění (řádky B-H) a v řádku A je jamka s 200 µl média bez antibiotika sloužící jako pozitivní kontrola růstu testovaných bakterií. Počáteční koncentrace jednotlivých antibiotik na destičce jsou rozdílné a jsou voleny tak, aby hodnoty MIC vyšetřovaných bakterií zahrnovaly rozmezí breakpointů citlivosti/rezistence podle závazných mezinárodních metodik Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) a European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) rozmezí hodnot MIC bakteriálních kmenů povinně testovaných v rámci kontroly kvality, které je pro jednotlivá antibiotika rozdílné. Pro enterobakterie je použito růstové médium CAMHB – kation adjusted Mueller-Hinton Broth a pro hemofily CAMHB s přídavkem 5 % lyzované koňské krve (CLSI, EUCAST). Ze zásobních koncentrací antimikrobiálních látek 10 000 mg/L se připravují pracovní koncentrace antimikrobik 1 000 mg/L (K 1 000), 10 mg/L (K 10) nebo 1 mg/L (K 1) ředěním ve sterilní destilované vodě, ze které se připraví finální koncentrace antimikrobik v objemu 25 ml do 96 velkých zkumavek. Finální koncentrace antimikrobik se připravují ředěním v růstovém médiu a jsou aplikovány do příslušných jamek na destičce v objemu 0,1 ml. Plnění jednotlivých jamek destiček z velkých zkumavek je prováděno laboratorním rozplňovacím přístrojem DYNATECH Laboratories 1036 Quick spenze IIE dle návodu výrobce. Rozplněné desky opatřené víčkem jsou baleny po 5 kusech do smrštitelné fólie a uloženy v -80 °C. Veškeré práce na přípravě a výrobě MIC setů (příprava roztoků antibiotik a jejich aplikace na destičky) probíhají v prostorách se zajištěnou filtrací vzduchu (třída čistoty A). Kontrola kvality výroby se provádí stanovením MIC antimikrobiálních látek u referenčních kmenů Escherichia coli ATCC 25922 a Haemophilus influenzae ATCC 49247 a provedením zkoušky sterility bezprostředně po výrobě a dále u jednotlivých šarží v týdenních intervalech až do exspirace výrobku – 6 měsíců ode dne výroby.

Czech name

Výroba setu ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u gramnegativních bakterií – II. řada

Czech description

Ověřená technologie popisuje detailně výrobu, kontrolu kvality a způsob použití setu ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antibiotik u gramnegativních bakterií. Umožňuje laboratorní in vitro stanovení citlivosti/rezistence klinických izolátů – humánních patogenů - gramnegativních bakterií především rodů Enterobacteriaceae spp. a Haemophilus spp.na základě stanovení minimálních inhibičních koncentrací (MIC) mikrodiluční metodou ke 12 antibiotikům (amikacin, piperacilin v kombinaci s tazobaktamem, cefoperazon, cefotaxim, ceftazidim, cefepim, cefoperazon v kombinaci se sulbaktamem, meropenem, ciprofloxacin, tigecyklin, tobramycin, piperacilin). Jedná se o mikrotitrační destičku s 96 jamkami - 12 sloupců (1-12) a 8 řádků (A-H). Ve sloupcích je v růstovém médiu naředěno dvanáct antibiotik používaných k léčbě infekcí lidí způsobených enterobakteriemi nebo hemofily v objemu 100 µl, u jedenácti antibiotik (sloupce 1-11) je na destičce 8 ředění (řádky A-H) a u jednoho antibiotika (sloupec 12) je 7 ředění (řádky B-H) a v řádku A je jamka s 200 µl média bez antibiotika sloužící jako pozitivní kontrola růstu testovaných bakterií. Počáteční koncentrace jednotlivých antibiotik na destičce jsou rozdílné a jsou voleny tak, aby hodnoty MIC vyšetřovaných bakterií zahrnovaly rozmezí breakpointů citlivosti/rezistence podle závazných mezinárodních metodik Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) a European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) rozmezí hodnot MIC bakteriálních kmenů povinně testovaných v rámci kontroly kvality, které je pro jednotlivá antibiotika rozdílné. Pro enterobakterie je použito růstové médium CAMHB – kation adjusted Mueller-Hinton Broth a pro hemofily CAMHB s přídavkem 5 % lyzované koňské krve (CLSI, EUCAST). Ze zásobních koncentrací antimikrobiálních látek 10 000 mg/L se připravují pracovní koncentrace antimikrobik 1 000 mg/L (K 1 000), 10 mg/L (K 10) nebo 1 mg/L (K 1) ředěním ve sterilní destilované vodě, ze které se připraví finální koncentrace antimikrobik v objemu 25 ml do 96 velkých zkumavek. Finální koncentrace antimikrobik se připravují ředěním v růstovém médiu a jsou aplikovány do příslušných jamek na destičce v objemu 0,1 ml. Plnění jednotlivých jamek destiček z velkých zkumavek je prováděno laboratorním rozplňovacím přístrojem DYNATECH Laboratories 1036 Quick spenze IIE dle návodu výrobce. Rozplněné desky opatřené víčkem jsou baleny po 5 kusech do smrštitelné fólie a uloženy v -80 °C. Veškeré práce na přípravě a výrobě MIC setů (příprava roztoků antibiotik a jejich aplikace na destičky) probíhají v prostorách se zajištěnou filtrací vzduchu (třída čistoty A). Kontrola kvality výroby se provádí stanovením MIC antimikrobiálních látek u referenčních kmenů Escherichia coli ATCC 25922 a Haemophilus influenzae ATCC 49247 a provedením zkoušky sterility bezprostředně po výrobě a dále u jednotlivých šarží v týdenních intervalech až do exspirace výrobku – 6 měsíců ode dne výroby.

Type

Z_tech - Verified technology

CEP classification

—

OECD FORD branch

30303 - Infectious Diseases

Project

<a href="/en/project/TG03010038" target="_blank" >TG03010038: Development of the "Proof-of-concept" support system at VRI</a><br>

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Publication year

2017

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Internal product ID

OT - Set na stanovení MIC – G- II. řada

Numerical identification

ISBN 978-80-88233-18-3

Technical parameters

Funkčnost výrobku byla ověřena formou pravidelného týdenního testování a kontrolou kvality vybraných vyrobených šarží. Kontrola kvality byla prováděna testováním kontrolních kmenů Escherichia coli ATCC 25922 a Haemophilus influenzae ATCC 49247, které jsou přesně definovány a jejich hodnoty MIC k antimikrobiálním látkám jsou uvedeny v laboratorních standardech CLSI a EUCAST. Hodnoty MIC u jednotlivých antimikrobik musí být v rozmezí definovaných hodnot MIC dle CLSI a EUCAST. Z průběhu kontrol byl zpracován Protokol o ověření technologie, nezávislý ověřovatel – LabMediaServis s.r.o.

Economical parameters

Ekonomické přínosy využívání výsledku lze rozdělit minimálně na dvě oblasti – zisk diagnostických laboratoří prováděním stanovení citlivosti/rezistence anaerobních bakterií k antibiotikům a ekonomický přínos pro chovatele hospodářských zvířat. Ekonomický přínos pro laboratoře bude představovat zisk z provedených vyšetření. Za předpokladu vyšetření v jedné laboratoři cca 500 vzorků ročně při ceně za jedno vyšetření kolem 500,- Kč, by se zisk 20 % z tržeb mohl pohybovat kolem 50 tis. pro jednu laboratoř. Dalším uživatelům výsledků vyšetření - chovatelům hospodářských zvířat se sníží zlepšením diagnostiky ekonomické náklady na léčbu a prevenci onemocnění a zvýší se tržby za prodej zdravotně nezávadných kvalitních potravin a surovin živočišného původu. Přesné vyčíslení přínosů chovatelům není možné, záleží vždy na zdravotní situaci a způsobu managementu v jednotlivých chovech.

Application category by cost

—

Owner IČO

00027162

Owner name

Výzkumný ústav veterinárního lékařství, v.v.i.

Owner country

CZ - CZECH REPUBLIC

Usage type

N - Využití výsledku jiným subjektem je možné bez nabytí licence (výsledek není licencován)

Licence fee requirement

—

Web page

https://www.vri.cz/userfiles/file/Overene_technologie/2017/VUVeL-Overena_technologie-4784-Nedbalcova-Vyr_setu_ke_stanov_minimal_inhib_koncentr_antimikrob_latek_u_gramnegativ_bakt-II.rada.pdf