Membrane assay for determination of modulation of activity of particular forskolin-sensitive human adenylate cyclases

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00159816%3A_____%2F18%3A00070403" target="_blank" >RIV/00159816:_____/18:00070403 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Membránový test pro stanovení specifického ovlivnění aktivity jednotlivých izoforem lidských adenylátcykláz citlivých na forskolin

Original language description

Cílem tohoto funkčního vzorku bylo zavést a validovat komplexní test pro analýzu ovlivnění aktivity specifických lidských membránově vázaných izoforem enzymu adenylátcykláz (AC 1-8). V lidském organismu bylo do této doby identifikováno 8 izoforem AC, které jsou aktivovatelné přírodní sloučeninou forskolinem, a které se vzájemně liší tkáňovou distribucí a možností regulace. Výzkum nových izoformově-specifických modulátorů naznačuje, že se AC mohou stát zajímavým přímým terapeutickým cílem léčiv nové generace. Cílené testování látek napříč jednotlivými izoformami tak umožní selekci a řízenou syntézu látek, které budou vysoce specifické vůči jednotlivým izoformám AC. Vyvinutá metodologie využívá membránové frakce izolované z unikátních klonů buněk HEK293 (human embryonic kidney cells 293), které selektivně exprimují vybranou izoformu AC. Bylo vyvinuto osm klonů buněk HEK293, z nichž každý klon obsahuje odlišný specifický plazmid kódující izoformu AC 1 až 8. Analýza ovlivnění aktivity jednotlivých membránově vázaných izoforem AC je detekována pomocí měření produkce cAMP metodou homogenní kompetitivní imunoanalýzy využívající k detekci Försterův rezonanční přenos energie s časovým rozlišením (TR-FRET). Metodika byla validována a byla provedena analýza opakovatelnosti (intra-assay variability a inter-assay variability).

Czech name

Membránový test pro stanovení specifického ovlivnění aktivity jednotlivých izoforem lidských adenylátcykláz citlivých na forskolin

Czech description

Cílem tohoto funkčního vzorku bylo zavést a validovat komplexní test pro analýzu ovlivnění aktivity specifických lidských membránově vázaných izoforem enzymu adenylátcykláz (AC 1-8). V lidském organismu bylo do této doby identifikováno 8 izoforem AC, které jsou aktivovatelné přírodní sloučeninou forskolinem, a které se vzájemně liší tkáňovou distribucí a možností regulace. Výzkum nových izoformově-specifických modulátorů naznačuje, že se AC mohou stát zajímavým přímým terapeutickým cílem léčiv nové generace. Cílené testování látek napříč jednotlivými izoformami tak umožní selekci a řízenou syntézu látek, které budou vysoce specifické vůči jednotlivým izoformám AC. Vyvinutá metodologie využívá membránové frakce izolované z unikátních klonů buněk HEK293 (human embryonic kidney cells 293), které selektivně exprimují vybranou izoformu AC. Bylo vyvinuto osm klonů buněk HEK293, z nichž každý klon obsahuje odlišný specifický plazmid kódující izoformu AC 1 až 8. Analýza ovlivnění aktivity jednotlivých membránově vázaných izoforem AC je detekována pomocí měření produkce cAMP metodou homogenní kompetitivní imunoanalýzy využívající k detekci Försterův rezonanční přenos energie s časovým rozlišením (TR-FRET). Metodika byla validována a byla provedena analýza opakovatelnosti (intra-assay variability a inter-assay variability).

Type

G_funk - Functional sample

CEP classification

—

OECD FORD branch

10608 - Biochemistry and molecular biology

Project

<a href="/en/project/TG02010048" target="_blank" >TG02010048: Support of commercialization of research and development results in the St. Anne's University Hospital in Brno</a><br>

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Publication year

2018

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Internal product ID

16_2018_FV

Numerical identification

Není k dispozici

Technical parameters

Výsledek byl uplatněn po ověření vlastností unikátního laboratorního zařízení - assay.

Economical parameters

FV slouží zatím k výzkumným účelům. Nyní nedochází k přímému prodeji vzorku. Případné vyčíslení prodejní ceny vychází z nákladu na vývoj, výrobu, materiál a přiměřený zisk.

Application category by cost

—

Owner IČO

00159816

Owner name

Fakultní nemocnice u sv. Anny v Brně

Owner country

CZ - CZECH REPUBLIC

Usage type

V - Výsledek je využíván vlastníkem

Licence fee requirement

Z - Poskytovatel licence na výsledek nepožaduje v některých případech licenční poplatek

Web page

—