Role of cytotoxic gamma-delta T cells in therapeutic resistance and recurrence of Glioblastoma Multiforme

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00216224%3A14110%2F21%3A00120150" target="_blank" >RIV/00216224:14110/21:00120150 - isvavai.cz</a>

Result on the web

<a href="https://www.linkos.cz/files/klinicka-onkologie/495.pdf" target="_blank" >https://www.linkos.cz/files/klinicka-onkologie/495.pdf</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Úloha cytotoxických gamma-delta T buněk na terapeutické rezistenci a recidivě Glioblastoma Multiforme

Original language description

Gamma-delta (γδ) T lymfocyty patří mezi významné efektorové buňky přirozené imunity s prokázanou protinádorovou reaktivitou proti agresivnímu nádoru mozku glioblastoma multiforme (GBM) (Knight et al., PLoS One 2013). Terapeutické přístupy imunoterapie GBM mají omezenou úspěšnost, zejména v důsledku ochranné bariéry mozku a imunosupresivního mikroprostředí nádoru. Cílem projektu je detailní analýza Vδ1 a Vδ2 populací γδ T lymfocytů infiltrovaných v nádorové tkáni a párových vzorcích periferní krve pacientů GBM. V projektu je zařazeno 33 pacientů GBM; 16 žen (48%) a 17 mužů (52%), medián věku pacientů byl 60 let (rozmezí 33-80let). Všichni pacienti byli operování na Neurochirurgické klinice FN Brno se snahou o maximální možnou cytoredukci a získání reprezentativních vzorků patologické tkáně. Po operaci byla u pacientů v Neuroonkologickém centru Brno na Neuroonkologické komisi MOÚ indikována komplexní onkologická terapie zahrnující standardní terapii podle Stuppova protokolu tj. konkomitantní chemo-radioterapií a adjuvantní chemoterapii temozolomidem, která včetně paliativních režimů probíhá na Klinice radiační onkologie a Klinice komplexní onkologické péče Masarykova onkologického ústavu. Populace CD3+Vδ1 γδ T buněk byla určena u zdravých dárců (HD, n=35, medián věku je 61 let) v periferní krvi průtokovou cytometrií v rozmezí 0,1-6,5% (medián 1,8%), CD3+Vδ2 γδ T lymfocyty u HD stanoveny v rozmezí 0,3-12,5% (medián 3,6%). U GBM pacientů byl nalezen signifikantní nárůst Vδ1 γδ T buněk (P&lt;0,01) ve srovnání se zdravými dárci. Vδ2 γδ T buňky byly u GBM pacientů sníženy (P&lt;0,05). Vzorky tumorů zpracováváme pomocí enzymatických kitů (disociátor Miltenyi), buněčné suspenze jsou analyzovány průtokovou cytometrií pro stanovení exprese receptorů NKG2D, DNAM1, TIGIT, PD-1 a Tim3. Nádorové buňky jsou fenotypovány protilátkami stresových ligandů MICA/B, ULBP a CD122, CD155. Dále jsme demonstrovali cytotoxickou reaktivitu γδ T lymfocytů vůči nádorovým liniím U251 a U373, a zejména vůči primárním nádorovým buňkám. Popsali jsme významnou úlohu EphA2 tyrosin kinázy v interakcích s Vδ1 T lymfocyty. Blokováním exprese EphA2 protilátkou a pomocí inhibitoru ALW-II-41-27 jsme pozorovali významné snížení specifické cytotoxicity. Analýza solubilních proteinů v plazmě pacientů metodou Luminex určila významně zvýšené hladiny MICA, check-point inhibitoru B7-H3 (CD276) a PD-L1 (B7-H1, CD274).

Czech name

Úloha cytotoxických gamma-delta T buněk na terapeutické rezistenci a recidivě Glioblastoma Multiforme

Czech description

Gamma-delta (γδ) T lymfocyty patří mezi významné efektorové buňky přirozené imunity s prokázanou protinádorovou reaktivitou proti agresivnímu nádoru mozku glioblastoma multiforme (GBM) (Knight et al., PLoS One 2013). Terapeutické přístupy imunoterapie GBM mají omezenou úspěšnost, zejména v důsledku ochranné bariéry mozku a imunosupresivního mikroprostředí nádoru. Cílem projektu je detailní analýza Vδ1 a Vδ2 populací γδ T lymfocytů infiltrovaných v nádorové tkáni a párových vzorcích periferní krve pacientů GBM. V projektu je zařazeno 33 pacientů GBM; 16 žen (48%) a 17 mužů (52%), medián věku pacientů byl 60 let (rozmezí 33-80let). Všichni pacienti byli operování na Neurochirurgické klinice FN Brno se snahou o maximální možnou cytoredukci a získání reprezentativních vzorků patologické tkáně. Po operaci byla u pacientů v Neuroonkologickém centru Brno na Neuroonkologické komisi MOÚ indikována komplexní onkologická terapie zahrnující standardní terapii podle Stuppova protokolu tj. konkomitantní chemo-radioterapií a adjuvantní chemoterapii temozolomidem, která včetně paliativních režimů probíhá na Klinice radiační onkologie a Klinice komplexní onkologické péče Masarykova onkologického ústavu. Populace CD3+Vδ1 γδ T buněk byla určena u zdravých dárců (HD, n=35, medián věku je 61 let) v periferní krvi průtokovou cytometrií v rozmezí 0,1-6,5% (medián 1,8%), CD3+Vδ2 γδ T lymfocyty u HD stanoveny v rozmezí 0,3-12,5% (medián 3,6%). U GBM pacientů byl nalezen signifikantní nárůst Vδ1 γδ T buněk (P&lt;0,01) ve srovnání se zdravými dárci. Vδ2 γδ T buňky byly u GBM pacientů sníženy (P&lt;0,05). Vzorky tumorů zpracováváme pomocí enzymatických kitů (disociátor Miltenyi), buněčné suspenze jsou analyzovány průtokovou cytometrií pro stanovení exprese receptorů NKG2D, DNAM1, TIGIT, PD-1 a Tim3. Nádorové buňky jsou fenotypovány protilátkami stresových ligandů MICA/B, ULBP a CD122, CD155. Dále jsme demonstrovali cytotoxickou reaktivitu γδ T lymfocytů vůči nádorovým liniím U251 a U373, a zejména vůči primárním nádorovým buňkám. Popsali jsme významnou úlohu EphA2 tyrosin kinázy v interakcích s Vδ1 T lymfocyty. Blokováním exprese EphA2 protilátkou a pomocí inhibitoru ALW-II-41-27 jsme pozorovali významné snížení specifické cytotoxicity. Analýza solubilních proteinů v plazmě pacientů metodou Luminex určila významně zvýšené hladiny MICA, check-point inhibitoru B7-H3 (CD276) a PD-L1 (B7-H1, CD274).

Type

O - Miscellaneous

CEP classification

—

OECD FORD branch

30204 - Oncology

Project

<a href="/en/project/NV19-05-00410" target="_blank" >NV19-05-00410: Role of cytotoxic gamma-delta T cells implicated in therapeutic resistence and tumour recurrence in Glioblastoma Multiforme</a><br>

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Publication year

2021

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů