Changes of neuronal electrical activity under the effect of glutamate and lower expression of miR-142-5p

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00216224%3A14110%2F24%3A00136406" target="_blank" >RIV/00216224:14110/24:00136406 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Změny neuronální elektrické aktivity pod vlivem glutamátu a snížené exprese miR-142-5p

Original language description

Úvod: Glutamát, hlavní excitační neurotransmiter v CNS, může být dle některých studií využit k navození epilepsie in vitro. Do rozvoje epilepsie rovněž zasahují změny exprese některých miRNA včetně miR-142-5p, což z nich činí možný terapeutický cíl. Cílem tohoto pilotního projektu bylo zhodnotit účinek specifického inhibitoru (antagomiru) proti miR-142-5p na neuronální aktivitu, ať už spontánní či navýšenou prostřednictvím glutamátu. Metodika: Měření elektrické aktivity hipokampálních neuronů izolovaných z neonatálních potkanů jsme prováděli pomocí techniky multielectrode array (MEA) od 7. dne in vitro (DIV) při vzorkovací frekvenci 25 kHz. DIV 13 byl do vybrané skupiny MEA čipů aplikován 10 μM glutamát (10-min aplikace s následným výplachem) a 6 dnů před plánovaným ukončením snímání jsme aplikovali 30 nM antagomir pro snížení exprese miR-142-5p (následuje měření 1., 2. a 5. den po jeho aplikaci). Analyzované parametry zahrnují frekvenci hrotových potenciálů (spiků) a počet aktivních elektrod. Výsledky: Během kultivace došlo k signifikantnímu nárůstu frekvence spiků i počtu aktivních elektrod jak u kontrolních MEA čipů, tak u čipů s přechodnou aplikací glutamátu (n=7, P0,05, resp. n=8, P0,01), avšak nebyl patrný rozdíl mezi kontrolou a glutamátem. Frekvence spiků po aplikaci 30 nM antagomiru vykazovala nesignifikantní sestupný trend, zatímco u kontrol nebyl obdobný pokles patrný; počet aktivních elektrod byl stabilní. Závěr: Dle našich dosavadních dat nelze přechodnou aplikaci glutamátu využít jako model epilepsie in vitro. Pilotní data poukazují na možný inhibiční vliv antagomiru proti miR-142-5p na spontánní elektrickou aktivitu neuronů. Pokud toto potvrdí i finální data, bude možné zvážit snížení exprese této miRNA jako alternativní léčbu farmakorezistentní epilepsie.

Czech name

Změny neuronální elektrické aktivity pod vlivem glutamátu a snížené exprese miR-142-5p

Czech description

Úvod: Glutamát, hlavní excitační neurotransmiter v CNS, může být dle některých studií využit k navození epilepsie in vitro. Do rozvoje epilepsie rovněž zasahují změny exprese některých miRNA včetně miR-142-5p, což z nich činí možný terapeutický cíl. Cílem tohoto pilotního projektu bylo zhodnotit účinek specifického inhibitoru (antagomiru) proti miR-142-5p na neuronální aktivitu, ať už spontánní či navýšenou prostřednictvím glutamátu. Metodika: Měření elektrické aktivity hipokampálních neuronů izolovaných z neonatálních potkanů jsme prováděli pomocí techniky multielectrode array (MEA) od 7. dne in vitro (DIV) při vzorkovací frekvenci 25 kHz. DIV 13 byl do vybrané skupiny MEA čipů aplikován 10 μM glutamát (10-min aplikace s následným výplachem) a 6 dnů před plánovaným ukončením snímání jsme aplikovali 30 nM antagomir pro snížení exprese miR-142-5p (následuje měření 1., 2. a 5. den po jeho aplikaci). Analyzované parametry zahrnují frekvenci hrotových potenciálů (spiků) a počet aktivních elektrod. Výsledky: Během kultivace došlo k signifikantnímu nárůstu frekvence spiků i počtu aktivních elektrod jak u kontrolních MEA čipů, tak u čipů s přechodnou aplikací glutamátu (n=7, P0,05, resp. n=8, P0,01), avšak nebyl patrný rozdíl mezi kontrolou a glutamátem. Frekvence spiků po aplikaci 30 nM antagomiru vykazovala nesignifikantní sestupný trend, zatímco u kontrol nebyl obdobný pokles patrný; počet aktivních elektrod byl stabilní. Závěr: Dle našich dosavadních dat nelze přechodnou aplikaci glutamátu využít jako model epilepsie in vitro. Pilotní data poukazují na možný inhibiční vliv antagomiru proti miR-142-5p na spontánní elektrickou aktivitu neuronů. Pokud toto potvrdí i finální data, bude možné zvážit snížení exprese této miRNA jako alternativní léčbu farmakorezistentní epilepsie.

Type

O - Miscellaneous

CEP classification

—

OECD FORD branch

30210 - Clinical neurology

Project

<a href="/en/project/GA23-05274S" target="_blank" >GA23-05274S: Therapeutic miRNA targeting in epilepsy: Impact on excitability and beyond</a><br>

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>S - Specificky vyzkum na vysokych skolach

Publication year

2024

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů