Common carp (Cyprinus carpio) germ cell cryopreservation and their use for surrogate reproduction

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F60076658%3A12520%2F19%3A43899668" target="_blank" >RIV/60076658:12520/19:43899668 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Zmrazování zárodečných buněk kapra obecného (Cyprinus carpio) a jejich využití k transplantaci do náhradních rodičů pro účely reprodukce

Original language description

Cílem metodiky je popsat manipulaci se samčími (spermatogonie) a samičími (oogonie) zárodečnými kmenovými buňkami kapra obecného (Cyprinus carpio) zahrnující jejich izolaci, zmrazování, a transplantaci do náhradních rodičů za účelem zefektivnění držení genových rezerv ex situ.

Czech name

Zmrazování zárodečných buněk kapra obecného (Cyprinus carpio) a jejich využití k transplantaci do náhradních rodičů pro účely reprodukce

Czech description

Cílem metodiky je popsat manipulaci se samčími (spermatogonie) a samičími (oogonie) zárodečnými kmenovými buňkami kapra obecného (Cyprinus carpio) zahrnující jejich izolaci, zmrazování, a transplantaci do náhradních rodičů za účelem zefektivnění držení genových rezerv ex situ.

Type

N_metC - Methodology certified by the authorised body

CEP classification

—

OECD FORD branch

10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)

Project

Result was created during the realization of more than one project. More information in the Projects tab.

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Publication year

2019

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Internal product ID

Metodika 178

Regulation ID

61388/2019 – MZE – 16232

Technical parameters

Vlastní postup pro dosažení výsledku zahrnuje odběr tkáně gonád, uložení do kryozkumavek s kryoprotektantem skládajícího se z 2 M dimetylsulfoxidu, 0.3 M glukózy, 10 % fetálního hovězí séra (FBS). Následně je tkáň zmrazena v hlubokomrazícím boxu (-80 °C) a poté umístěna do tekutého dusíku. Pro obnovení je zkumavka vyjmuta z dusíku, rozmrazena ve vodní lázni o teplotě 26 °C. Rozmrazená tkáň gonád je disociována na buněčnou suspenzi pomocí 0,1% trypsinu, která je následně přefiltrována a centrifugována. Získaná peleta buněk je resuspendována a promyta v buněčném médiu. Takto připravená suspenze je transplantována do tělní dutiny náhradních rodičů karasa zlatého ve věku (1-2 týdnů), kteří byli vysterilizování pomocí dočasné inhibice genu zodpovědného za vývoj endogenních zárodečných buněk. Transplantované zárodečné buňky kapra kolonizují gonádu náhradních rodičů a po dosažení pohlavní dospělosti (2-3 roky) produkují gamety kapra obecného. Uzavřena smlouva o uplatnění metodiky s podnikem Rybářství Nové Hrady, se sídlem Štiptoň 78, 374 01 Nové Hrady, IČO 15789799. Smlouva uzavřena dne 18.11.2019. Publikace v odborném periodiku: Franěk, R., Marinović, Z., Lujić, J., Urbányi, B., Fučíková, M., Kašpar, V., Pšenička, M., Horváth, Á. Cryopreservation and transplantation of common carp spermatogonia. PLoS ONE 14(4): e0205481. Franěk, R., Tichopád, T., Steinbach, C., Xie, X., Lujić, J., Marinović, Z., Horváth, Á, Kašpar, V., Pšenička M. Preservation of female genetic resources of common carp through oogonial stem cell manipulation. Cryobiology 87:78-85.

Economical parameters

Trvalé zajištění části genofondu formou zmrazených buněk s možností jejich rychlého obnovení formou transplantace do náhradních rodičů povede ke snížení ekonomických nákladů spojených s nutností držet živý genofond a jeho zálohy pro případ nenadálé ztráty.

Certification body designation

Ministerstvo zemědělství, Těšnov 65/17; 110 00 Praha 1

Date of certification

—

Method of use

C - Výsledek je využíván bez omezení okruhu uživatelů