Potato mesophyll protoplast isolation and protoplast fusion using electric field

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F60109807%3A_____%2F03%3A00010414" target="_blank" >RIV/60109807:_____/03:00010414 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

angličtina

Original language name

Potato mesophyll protoplast isolation and protoplast fusion using electric field

Original language description

Mesophyll protoplasts were isolated from leaves of primary potato dihaploids, potato tetraploid of variety Bintje and from leaves of wild potato species S. brevidens (EBN = 1, 2n=24), S. bulbocastanum (EBN = 1, 2n=24). Donor plants were cultured on SH medium in vitro supplemented with 5 mg/l AgNO3 and 3 mg/l Alar 85 and 1,5% sucrose. Protoplasts were isolated in ezymatic mixture of 1% Cellulase Onozuka R-10 and 0,2% Macerozyme R-10 (or 2/3 of this concentration). Refined protoplasts were cultured on medium by Sidorov (1987), modified by Briza and Machova (1991). Conditions of electrofusion were optimized for protoplasts. Alternative current of 5 V was used for protoplast alignment with manual control of length of AC field activity. 1 pulse of direct current of 10 V and length of 80 us was used for the protoplast fusion. Protoplast viability was evaluated using FDA. In many the combinations tested, cell wall regeneration and in several cases microcolony formation was observed after elec

Czech name

Izolace a fúze mezofylových protoplastů bramboru elektrickým polem

Czech description

Mezofylové protoplasty byly izolovány z listů primárních dihaploidů bramboru, tetraploidní odrůdy Bintje a z listů planých druhů S. brevidens (EBN = 1, 2n=24), S. bulbocastanum (EBN = 1, 2n=24). Donorové rostliny byly kultivovány na médiu SH s přídavkem5 mg/l AgNO3 a 3 mg/l Alar 85 a 1,5% sucrose. Protoplasty byly izolovány v ezymatické směsi 1% Cellulase Onozuka R-10 a 0,2% Macerozyme R-10 (nebo 2/3 této koncentrace). Vyčištěné protoplasty byly kultivovány na mediu dle Sidorova (1987), modifikovaném dle Břizy a Machové (1991). Podmínky electrofúze byly optimializovány pro protoplasty. K seřazení protoplastů byl aplikován střídavý proud 5 V s manuální kontrolou doby působení střídavého proudu. Pro fúzi protoplastů byl aplikován 1 puls stejnosměrného proud 10 V o délce 80 us. Životnost protoplastů byla hodnocena pomocí FDA. V mnoha testovaných kombinacích byla pozorována regenerace buněčných stěn a v několika případech tvorba mikrokolonií po fúzi elektrickým polem.

Type

D - Article in proceedings

CEP classification

EI - Biotechnology and bionics

OECD FORD branch

—

Project

<a href="/en/project/OC%20843.20" target="_blank" >OC 843.20: Somatic hybridization in potato breeding</a><br>

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Publication year

2003

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Article name in the collection

Materialy Meždunarodnoj jubilejnoj naučno-praktičeskoj konferencii posvjaščennoj 75-letiju Instituta kartofelevodstva Nacionalnoj akademii nauk Belarusi

ISBN

—

ISSN

—

e-ISSN

—

Number of pages

4

Pages from-to

337-340

Publisher name

Merlit

Place of publication

Minsk

Event location

Samochvaloviči

Event date

Jul 7, 2003

Type of event by nationality

WRD - Celosvětová akce

UT code for WoS article

—