Single-step affinity purification of recombinant proteins using a self-excising module from Neisseria meningitidis FrpC

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F61388971%3A_____%2F08%3A00313119" target="_blank" >RIV/61388971:_____/08:00313119 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

angličtina

Original language name

Single-step affinity purification of recombinant proteins using a self-excising module from Neisseria meningitidis FrpC

Original language description

We developed a self-excising tag allowing single-step affinity chromatography purification of untagged recombinant proteins. It consists of a 250 residue-long self-processing module of Neisseria meningitidis FrpC protein with a C-terminal affinity tag. N-terminus of the module is fused to the C-terminus of a target protein of interest. Upon binding of the fusion protein to an affinity matrix from cell lysate and washing out of contaminating proteins, site-specific cleavage of the Asp-Pro bond linking the target protein to the self-excising tag is induced by calcium ions. This results in release of the target protein with only a single aspartic acid residue added at the C-terminus, while the self-excising affinity tag remains trapped on the affinity matrix

Czech name

Jednokroková afinitní purifikace rekombinantních proteinů založená na samoštěpícím modulu proteinu FrpC bakterie Neisseria meningitidis

Czech description

Anotace v českém jazyce Vyvinuli jsme samoštěpící kotvu umožňující jednokrokovou afinitní purifikaci rekombinantních proteinů. Sestává ze samoštěpícího modulu o velikosti 250 aminokyselinových zbytků, který byl izolován z proteinu FrpC bakterie Neisseriameningitidis a C-koncové afinitní kotvy. N-konec modulu je fúzován s C-koncem požadovaného proteinu. Po vazbě fúzního proteinu z buněčného lyzátu k afinitní matrici a odstranění kontaminujících proteinů je pomocí vápenatých iontů indukováno specifické štěpení mezi zbytky Asp-Pro spojujícími požadovaný protein a samoštěpící kotvu. To vede k uvolnění požadovaného proteinu nesoucího na svém C-konci pouze jeden aspartátový zbytek navíc, přičemž samoštěpící kotva zůstane zachycena na afinitní matrici

Type

J_x - Unclassified - Peer-reviewed scientific article (Jimp, Jsc and Jost)

CEP classification

EE - Microbiology, virology

OECD FORD branch

—

Project

Result was created during the realization of more than one project. More information in the Projects tab.

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)

Publication year

2008

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Name of the periodical

Protein Science

ISSN

0961-8368

e-ISSN

—

Volume of the periodical

17

Issue of the periodical within the volume

10

Country of publishing house

US - UNITED STATES

Number of pages

10

Pages from-to

—

UT code for WoS article

000259401900021

EID of the result in the Scopus database

—