Quantitative real-time PCR study on persistence of pDNA vaccine pVax-Hsp60 TM814 in beef muscles

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F61989592%3A15110%2F08%3A00007183" target="_blank" >RIV/61989592:15110/08:00007183 - isvavai.cz</a>

Alternative codes found

RIV/61388963:_____/08:00315996 RIV/00027162:_____/08:#0000345

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

angličtina

Original language name

Quantitative real-time PCR study on persistence of pDNA vaccine pVax-Hsp60 TM814 in beef muscles

Original language description

Background: Application of plasmid DNA for immunization of food-producing animals established new standards of food safety. The addition of foreign products e.g. pDNA into the food chain should be carefully examined to ensure that neither livestock animals nor consumers develop unpredicted or undesirable side-effects. Methods: A quantitative real-time PCR (QRTPCR) methodology was developed to study the biodistribution and persistence of plasmid DNA vaccine pDNAX (pVAX-Hsp60 TM814) in mice and beef cattle. The linear quantification range and the sensitivity of the method was found to be 10 - 10exp9 copies per reaction (500 ng/gDNA) and 3 copies per reaction, respectively. Results: Persistence of pDNAX in mice muscle tissue was restricted to injection site and the amount of pDNAX showed delivery formulation dependent (naked pDNA, electroporation, cationic liposome complexes) and mouse age-dependent clearance form injection site but pDNAX was still detectable even after 365 days. The QRTP

Czech name

Studie přežívání plasmidové DNA vakcíny pVax-Hsp60 TM814 v svalech experimentálních telat pomocí kvantitativní RT-PCR

Czech description

Využití plasmidové DNA technologie pro imunizaci zvířat používných k produkci potravy vytváří požadavek na nové standardy bezpečnosti. Metoda: Kvantitativní PCR v reálném čase (QRTPCR) byla rozpracována pro studii biodistribuce a přetrvávání plasmidové DNA (pVAX-Hsp60 TM814) u myší a telat. Lineární rozsah a senzitivita byla stanovena na 1 ? 10exp90 kopií na reakci (500ng / g DNA) neboli tři kopie na jednu reakci. Výsledky: Přetrvávání plasmidové DNA po intramuskulární aplikaci prokázala pouze lokální přetrvávání v místě injekce a její eliminace závisela na způsobu aplikace (holá pDNA, elektroporace, kationické liposomární komplexy) a věku myší ale byla prokazatelná i po jednom roce. QRTPCR analýza různých vzorků svalu vakcinovaných telat provedená 242-292 po poslední DNA vakcinaci prokázal přítomnost DNA pouze v místech injekce. Nejvyšší koncentrace plasmidu 290 kopií na reakci byla prokázána ve vzorcích po pDNAX:CDAN/DOPE aplikace podobně jako ve skupině myší. Žádné vzorky DNA nebyly

Type

J_x - Unclassified - Peer-reviewed scientific article (Jimp, Jsc and Jost)

CEP classification

EC - Immunology

OECD FORD branch

—

Project

<a href="/en/project/QF3115" target="_blank" >QF3115: Development of vectors, carriers and adjuvants for the constructoin of DNA vaccines</a><br>

Continuities

Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)

Publication year

2008

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Name of the periodical

Genetic Vaccines and Therapy

ISSN

1479-0556

e-ISSN

—

Volume of the periodical

6

Issue of the periodical within the volume

2

Country of publishing house

GB - UNITED KINGDOM

Number of pages

11

Pages from-to

—

UT code for WoS article

—

EID of the result in the Scopus database

—