Development of an LC-MS/MS method for the determination of biomarkers of atypical equine myopathy from dry blood spots
The result's identifiers
Result code in IS VaVaI
<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F62157124%3A16170%2F24%3A43881735" target="_blank" >RIV/62157124:16170/24:43881735 - isvavai.cz</a>
Result on the web
—
DOI - Digital Object Identifier
—
Alternative languages
Result language
čeština
Original language name
Vývoj LC-MS/MS metody pro stanovení biomarkerů atypické myopatie koní ze suché krevní skvrny
Original language description
Atypická myopatie (AM) je onemocnění provázené akutní rhabdomyolýzou a postihuje koně na pastvě. Příčinou rozvoje tohoto onemocnění je intoxikace hypoglycinem A (HGA) a methylencyklopropylglycinem (MCPrG) přítomných v některých druzích javoru (Acer). Tyto neproteinogenní aminokyseliny se po pozření v těle zvířat metabolizují a způsobují inhibici β-oxidace mastných kyselin.V České republice bylo mezi lety 2011−2020 evidováno celkem 112 případů AM. V Evropě průměrně tři čtvrtiny pacientů umírají do 72 hodin od prvních příznaků. S tím souvisí problematika rychlosti a dostupnosti diagnostiky, která je v progresi tohoto onemocnění stěžejní. Toxiny způsobující AM se v laboratořích ale neanalyzují rutinně. V ČR jsou zavedeny metody pro stanovení toxinů pouze v Laboratoři dědičných metabolických poruch Lékařské fakulty Univerzity Palackého v Olomouci a v toxikologické laboratoři Ústavu ochrany a welfare zvířat a veřejného veterinárního lékařství Veterinární univerzity Brno. Jednou z analytických technik, která odpovídá výše zmíněným požadavkům diagnostiky, je kapalinová chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC-MS/MS). Dosavadní LC-MS/MS metody pro analýzu diagnosticky významných látek ze suchých krevních skvrn (DBS) však zahrnují derivatizaci analytů, což významně prodlužuje dobu přípravy vzorku. V této práci byla vyvinuta a částečně validována LC-MS/MS metoda bez nutnosti derivatizace analytů ve vzorku. Metoda se vyznačuje jednodušší a kratší přípravou vzorku (zkrácení ze 2 dnů na přibližně 4 hodiny), krátkou dobou analýzy (9 minut) a nízkou finanční nákladovostí. Touto metodou lze stanovit toxiny prokazující AM, konkrétně HGA a MCPrG a metabolit odvozený od HGA – methylencyklopropylacetyl-karnitin (MCPA-karnitin), dále také osm acylkarnitinů a čtyři acylglyciny signifikantně se zvyšující v krvi koní s AM.Nově vyvinutá LC-MS/MS metoda má potenciál pro zavedení do rutinní diagnostické praxe, což by umožnilo rychlou diagnostiku pacientů, včasné nasazení léčby a příznivé ovlivnění progrese AM.
Czech name
Vývoj LC-MS/MS metody pro stanovení biomarkerů atypické myopatie koní ze suché krevní skvrny
Czech description
Atypická myopatie (AM) je onemocnění provázené akutní rhabdomyolýzou a postihuje koně na pastvě. Příčinou rozvoje tohoto onemocnění je intoxikace hypoglycinem A (HGA) a methylencyklopropylglycinem (MCPrG) přítomných v některých druzích javoru (Acer). Tyto neproteinogenní aminokyseliny se po pozření v těle zvířat metabolizují a způsobují inhibici β-oxidace mastných kyselin.V České republice bylo mezi lety 2011−2020 evidováno celkem 112 případů AM. V Evropě průměrně tři čtvrtiny pacientů umírají do 72 hodin od prvních příznaků. S tím souvisí problematika rychlosti a dostupnosti diagnostiky, která je v progresi tohoto onemocnění stěžejní. Toxiny způsobující AM se v laboratořích ale neanalyzují rutinně. V ČR jsou zavedeny metody pro stanovení toxinů pouze v Laboratoři dědičných metabolických poruch Lékařské fakulty Univerzity Palackého v Olomouci a v toxikologické laboratoři Ústavu ochrany a welfare zvířat a veřejného veterinárního lékařství Veterinární univerzity Brno. Jednou z analytických technik, která odpovídá výše zmíněným požadavkům diagnostiky, je kapalinová chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC-MS/MS). Dosavadní LC-MS/MS metody pro analýzu diagnosticky významných látek ze suchých krevních skvrn (DBS) však zahrnují derivatizaci analytů, což významně prodlužuje dobu přípravy vzorku. V této práci byla vyvinuta a částečně validována LC-MS/MS metoda bez nutnosti derivatizace analytů ve vzorku. Metoda se vyznačuje jednodušší a kratší přípravou vzorku (zkrácení ze 2 dnů na přibližně 4 hodiny), krátkou dobou analýzy (9 minut) a nízkou finanční nákladovostí. Touto metodou lze stanovit toxiny prokazující AM, konkrétně HGA a MCPrG a metabolit odvozený od HGA – methylencyklopropylacetyl-karnitin (MCPA-karnitin), dále také osm acylkarnitinů a čtyři acylglyciny signifikantně se zvyšující v krvi koní s AM.Nově vyvinutá LC-MS/MS metoda má potenciál pro zavedení do rutinní diagnostické praxe, což by umožnilo rychlou diagnostiku pacientů, včasné nasazení léčby a příznivé ovlivnění progrese AM.
Classification
Type
O - Miscellaneous
CEP classification
—
OECD FORD branch
40301 - Veterinary science
Result continuities
Project
<a href="/en/project/QL24010403" target="_blank" >QL24010403: Diagnostics and possibilities of prevention of atypical myopathy in the Czech Republic</a><br>
Continuities
P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)
Others
Publication year
2024
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů