Haemoprotozoans of australian scink Egernia stokesii ? morphological and molecular characteristics

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F62157124%3A16810%2F19%3A43878243" target="_blank" >RIV/62157124:16810/19:43878243 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Hemoprotozoa australského scinka Egernia stokesii ? morfologická a molekulární charakteristika

Original language description

Australský scink Egernia stokesii je hostitelem dvou rodů intracelulárních krevních parazitů ? Hemolivia a Plasmodium. Zatím co pro hemogregarinu Hemolivia mariae jsou dostupná jak morfologická tak i molekulárně genetická data, u plasmodií tyto informace nejsou kompletní. Z více než 100 druhů plasmodií ještěrů jsou popsány dva duhy parazitující u scinka E. stokesii: P. mackerrasae a P. circularis. Další plasmodium P. egerniae bylo nalezeno u scinka stejného rodu E. major. Databáze GenBank disponuje sekvencemi 16 druhů plazmódií z ješterů, včetne sekvence plasmodia z hostitele E. stokesii prezentované jako P. mackerrasae, která se fylogeneticky nečekaně zařazuje do skupiny Haemocystidium, avšak morfologický popis tohoto plasmodia chybí. Pro naši studii jsou využity krevní nátery a vzorky izolované DNA z krve šesti scinků E. stokesii. Krevní nátěry barveny podle Giemsy byli mikroskopicky vyšetřeny a z pozitivních krevních nátěrů byla získána morfologická charakteristika intraerytrocytárních stádií plasmodií. Parazitémie byla odhadována v procentech na 10 000 erytrocytů. Pro molekulárně genetickou analýzu byly použity čtyři sety nested primerů amplifikujících různé fragmenty mitichondriálního genu pro cytochrom b. Pozitivní produkty PCR budou purifikovány a zaslány k sekvenování formou služeb v komerční firmě Macrogen (Nizozemsko). Obdržené sekvence budou spracovány a fylogeneticky analyzovány v programu Geneious. Na základě dosavadních poznatků a mikroskopie jsou pozorovaná stádia plasmodií nejvíce morfologicky podobná P. mackerrasae. Parazitémie na plasmodia pozitivních krevních nátěrů (2/6) byla 3.84% a 4.72%. Tyto dva vzorky byli také PCR pozitivní v případě všech čtyř setů primerů. Fylogenetická analýza datasetu námi získaných a již známých sekvencí z genové databáze, především sekvencí plasmodií ještěrů, včetne rozporuplné sekvence P. mackerrasae, by měla objasnit rodovou příslušnost tohoto krevního parazita.

Czech name

Hemoprotozoa australského scinka Egernia stokesii ? morfologická a molekulární charakteristika

Czech description

Australský scink Egernia stokesii je hostitelem dvou rodů intracelulárních krevních parazitů ? Hemolivia a Plasmodium. Zatím co pro hemogregarinu Hemolivia mariae jsou dostupná jak morfologická tak i molekulárně genetická data, u plasmodií tyto informace nejsou kompletní. Z více než 100 druhů plasmodií ještěrů jsou popsány dva duhy parazitující u scinka E. stokesii: P. mackerrasae a P. circularis. Další plasmodium P. egerniae bylo nalezeno u scinka stejného rodu E. major. Databáze GenBank disponuje sekvencemi 16 druhů plazmódií z ješterů, včetne sekvence plasmodia z hostitele E. stokesii prezentované jako P. mackerrasae, která se fylogeneticky nečekaně zařazuje do skupiny Haemocystidium, avšak morfologický popis tohoto plasmodia chybí. Pro naši studii jsou využity krevní nátery a vzorky izolované DNA z krve šesti scinků E. stokesii. Krevní nátěry barveny podle Giemsy byli mikroskopicky vyšetřeny a z pozitivních krevních nátěrů byla získána morfologická charakteristika intraerytrocytárních stádií plasmodií. Parazitémie byla odhadována v procentech na 10 000 erytrocytů. Pro molekulárně genetickou analýzu byly použity čtyři sety nested primerů amplifikujících různé fragmenty mitichondriálního genu pro cytochrom b. Pozitivní produkty PCR budou purifikovány a zaslány k sekvenování formou služeb v komerční firmě Macrogen (Nizozemsko). Obdržené sekvence budou spracovány a fylogeneticky analyzovány v programu Geneious. Na základě dosavadních poznatků a mikroskopie jsou pozorovaná stádia plasmodií nejvíce morfologicky podobná P. mackerrasae. Parazitémie na plasmodia pozitivních krevních nátěrů (2/6) byla 3.84% a 4.72%. Tyto dva vzorky byli také PCR pozitivní v případě všech čtyř setů primerů. Fylogenetická analýza datasetu námi získaných a již známých sekvencí z genové databáze, především sekvencí plasmodií ještěrů, včetne rozporuplné sekvence P. mackerrasae, by měla objasnit rodovou příslušnost tohoto krevního parazita.

Type

O - Miscellaneous

CEP classification

—

OECD FORD branch

40301 - Veterinary science

Project

—

Continuities

I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Publication year

2019

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů