Insights into catalytic action mechanism of Pseudomonas mendocina 3121-1 lipase
The result's identifiers
Result code in IS VaVaI
<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F67179843%3A_____%2F04%3A00102710" target="_blank" >RIV/67179843:_____/04:00102710 - isvavai.cz</a>
Result on the web
—
DOI - Digital Object Identifier
—
Alternative languages
Result language
angličtina
Original language name
Insights into catalytic action mechanism of Pseudomonas mendocina 3121-1 lipase
Original language description
The hydrolysis of p-nitrophenyl butyrate catalyzed by Pseudomonas mendocina 3121-1 lipase was strongly affected by guanidine hydrochloride indicating the importance of Arg residue. Since loss of the activity in the presence of urea was negligible, the inactivation could not be attributed to protein denaturation. The enzyme was unaffected by p-chlormercuribenzoic acid (p-CMB), 2-mercaptoethanol and N-ethylmaleimide (NEM) at pH 7.0 indicating that Cys residue was essential neither to catalytic action norto structural features of the lipase. The inactivation by K3Fe(CN)6 implied that another oxidizable amino acid residue could be important. The inactivation by N-ethylmaleimide at pH 9.0 indicated the involvement of His in the catalysis. Phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF) strongly inhibited the enzyme pointing out the essential role of Ser residue
Czech name
Pohled na mechanismus katalýzy lipasy z Pseudomonas mendocina 3121-1
Czech description
Hydrolýza p-nitrofenyl butyrátu katalyzovaná lipasou z Pseudomonas mendocina 3121-1 byla silně ovlivněna guanidin hydrochloridem, ukazujícím podstatný význam argininového zbytku. Protože ztráta aktivity v přítomnosti močoviny byla nevýznamná, inaktivacenemohla být spojována s denaturací proteinu. Enzymová aktivita nebyla ovlivněna kyselinou p-chlormerkuribenzoovou (p-CMB), 2-merkaptoethanolem a N-ethylmaleinimidem (NEM) při pH 7.0, což ukazuje, že cysteinové zbytky nebyly nezbytné ani pro katalytickouaktivaci ani pro strukturální vlastnosti lipasy. Inaktivace působením K3Fe(CN)6 ukázala, že jiný oxidovatelný zbytek aminokyseliny by mohl být důležitý. Inaktivace N-ethylmaleinimidem při pH 9.0 prokázala spoluúčast histidinu v katalýze. Fenylmethylsulfonylchlorid (PMSF) silně inhiboval enzym, což by vysvětlovalo esenciální úlohu serinového zbytku
Classification
Type
J<sub>x</sub> - Unclassified - Peer-reviewed scientific article (Jimp, Jsc and Jost)
CEP classification
CE - Biochemistry
OECD FORD branch
—
Result continuities
Project
<a href="/en/project/KSK4055109" target="_blank" >KSK4055109: Physics, chemistry and informatics for biological, ecological and medicinal applications</a><br>
Continuities
P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)
Others
Publication year
2004
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data specific for result type
Name of the periodical
Enzyme and Microbial Technology
ISSN
0141-0229
e-ISSN
—
Volume of the periodical
34
Issue of the periodical within the volume
-
Country of publishing house
NL - THE KINGDOM OF THE NETHERLANDS
Number of pages
6
Pages from-to
572-577
UT code for WoS article
—
EID of the result in the Scopus database
—