The control of viremia by neutralizing antibodies and localization of neutralization epitopes of porcine circovirus 2
Project goals
The main objective of the present project is to testing of hypothesis, that the titre of neutralizing antibodies influences the level of viremia in PCV-2 infected piglets. Viremia and the titer of neutralizing antibodies will be quantified in experimentally and naturally infected piglets by real-time PCR and serological methods. Additional objective of this study is to evaluate neutralizing effect of scFv antibodies against capsid protein of porcine circovirus 2 (PCV-2) and to localise neutralization epitopes. We plan to generate scFv antibodies against recombinant capsid protein of virus and to evaluate neutralizing activity of these antibodies by virus titration on tissue cultures. Although neutralizing activity of immune sera was demonstrated in thecase of PCV-2 virus, the exact localization of neutralizing epitope(s) was never demonstrated. The advantage of using scFv antibodies instead of standard monoclonal antibodies is the shortening of selection procedure (weeks instead of
Keywords
Public support
Provider
Czech Science Foundation
Programme
Standard projects
Call for proposals
Standardní projekty 9 (SGA02006GA-ST)
Main participants
—
Contest type
VS - Public tender
Contract ID
524/06/1640
Alternative language
Project name in Czech
Vliv neutralizačních protilátek na virémii a lokalizace neutralizačních epitopů cirkoviru prasat 2
Annotation in Czech
Hlavním cílem projektu je testování hypotézy, že titr neutralizačních protilátek ovlivňuje úroveň viremie u PCV-2 infikovaných selat. Viremie i titr neutralizačních protilátek bude kvantifikována na experimentálně i přirozeným způsobem infikovaných selatech pomocí real-time PCR a sérologických testů. Dalším cílem projektu je přesná lokalizace neutralizačních epitopů na povrchu proteinu kapsidy circoviru prasat 2 (PCV-2). Uskutečníme selekci scFv protilátek proti rekombinantnímu proteinu kapsidy viru a stanovíme jejich neutralizační aktivitu titrací na buněčných kulturách. Ačkoliv neutralizace viru protilátkami byla již u PCV-2 viru prokázána, přesná lokalizace neutralizačních epitopů nebyla zatím stanovena. Výhoda použití scFv protilátek ve srovnání sklasickými monoklonálními protilátkami je ve zkrácení doby pottřebné pro selekci (týdny místo měsíců), v možnosti ovlivňování afinity vazby těchto molekul a jejich perspektivího využití v diagnostice a případně terapii onemocnění. Předkládaný
Scientific branches
R&D category
ZV - Basic research
CEP classification - main branch
GJ - Diseases and animal vermin, veterinary medicine
CEP - secondary branch
EE - Microbiology, virology
CEP - another secondary branch
EB - Genetics and molecular biology
10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)
10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)
10605 - Developmental biology
10606 - Microbiology
10607 - Virology
10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
30101 - Human genetics
40301 - Veterinary science
Completed project evaluation
Provider evaluation
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Project results evaluation
We have successfully expressed ORF2 protein of PCV2 virus in two variants. The first one was truncated protein without nuclear localization signal, the second one using E.coli cells expressing "rare" tRNAs. Resulting protein was used as an antigen in the
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 2006
Realization period - end
Dec 31, 2008
Project status
U - Finished project
Latest support payment
Apr 25, 2008
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP09-GA0-GA-U/02:2
Data delivery date
Oct 22, 2009
Finance
Total approved costs
1,825 thou. CZK
Public financial support
1,825 thou. CZK
Other public sources
0 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK
Basic information
Recognised costs
1 825 CZK thou.
Public support
1 825 CZK thou.
100%
Provider
Czech Science Foundation
CEP
GJ - Diseases and animal vermin, veterinary medicine
Solution period
01. 01. 2006 - 31. 12. 2008