Role of BMH proteins in the regulation of yeast enzyme neutral trehalase
Project goals
The overall goal of this project is tounderstand the structural basis of BMH–dependent regulation of the activity ofthe enzyme Neutral trehalase (NTH1). Site-directed mutagenesis, steady-statefluorescence spectroscopy, time-resolved fluorescence spectroscopy, X-raycrystallography, analytical ultracentrifugation and enzyme kineticsmeasurements will be the principal tools. NTH1 is responsible for trehalosedegradation and is required in a variety stress conditions. Activity of theNTH1 enzyme was just recently found to be mediated by BMH1 and BMH2 binding inyeast. The role of yeast BMH proteins in the regulation of NTH1 seems toincreasethe enzymatic activity of the NTH1 enzyme. However details concerninginteraction between the BMH proteins and NTH1 remain still unknown. Sincetrehalose metabolism is an essential component of the stress response inyeastcells, thus, the elucidation of the mechanisms of NTH1 protein regulation,which is still unresolved, would provide us with important informationconcerning mechanisms of both the 14-3-3 protein function and the regulation ofthe neutral trehalase activity in yeast.
Keywords
14-3-3proteinneutraltrehalasefluorescenceactivityassayproteincrystallography
Public support
Provider
Czech Science Foundation
Programme
Standard projects
Call for proposals
Standardní projekty 14 (SGA02011GA-ST)
Main participants
Fyziologický ústav AV ČR, v. v. i.
Contest type
VS - Public tender
Contract ID
P207-11-0455
Alternative language
Project name in Czech
Úloha BMH proteinů v regulaci kvasničného enzymu neutrální trehalásy
Annotation in Czech
Hlavním cílem tohoto projektu je porozumění strukturní podstaty regulace aktivity enzymu neutrální trehalasy (NTH1) prostřednictvím vazby BMH proteinů. Hlavními metodami budou cílená mutageneze, stacionární a časově rozlišená fluorescenční spektroskopie, proteinová krystalografie, analytická ultracentrifugace a studium enzymové kinetiky. NTH1 je zodpovědná za degradaci trehalosy a je vyžadována v řadě stresových situací. Nedávno bylo zjištěno, že aktivita enzymu NTH1 je v kvasinkách regulována vazbou BMH proteinů. Úloha kvasničných BMH proteinů v regulaci NTH1 se zdá být zvyšování enzymové aktivity NTH1 enzymu. Avšak detaily týkající se interakce mezi BMH proteiny a NTH1 stále zůstávají neobjasněny. Poněvadž metabolismus trehalosy je základní složkou odpovědi na stres v buňkách kvasinek, objasnění mechanismů regulace aktivity NTH1, které je stále nevyřešeno, nám poskytne velmi důležitou informaci týkající se mechanismu jak funkce 14-3-3 proteinu, tak i regulace aktivity neutrální trehalasy v kvasinkách.
Scientific branches
Completed project evaluation
Provider evaluation
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Project results evaluation
The planned objectives were met. The grant project significantly contributed to the characterization of yeast enzyme neutral trehalase. In addition, two new binding sites with the molecule of Nth1 were indentified. The obtained results were published in a high-level journals.
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 2011
Realization period - end
Dec 31, 2015
Project status
U - Finished project
Latest support payment
Mar 26, 2015
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP16-GA0-GA-U/01:1
Data delivery date
Sep 25, 2017
Finance
Total approved costs
5,975 thou. CZK
Public financial support
5,975 thou. CZK
Other public sources
0 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK
Basic information
Recognised costs
5 975 CZK thou.
Public support
5 975 CZK thou.
100%
Provider
Czech Science Foundation
CEP
CE - Biochemistry
Solution period
01. 01. 2011 - 31. 12. 2015