Structure-function relationship in maize beta-glucosidase specific for cytokinin glucosides: the role of cysteine residues

Provider

Academy of Sciences of the Czech Republic

Programme

Grants of distinctly investigative character focused on the sphere of research pursued at present particularly in the Academy of Sciences of the Czech Republic

Call for proposals

—

Main participants

Biofyzikální ústav AV ČR, v. v. i.

Contest type

—

Contract ID

—

Project name in Czech

Vztah mezi strukturou a funkcí kukuřičné beta-glukozidázy specifické pro konjugáty cytokininů: úloha cysteinových zbytků

Annotation in Czech

Znalosti role cysteinových zbytků ve vztahu mezi strukturou a funkcí beta-glukozidázy jsou omezené. Klonovali jsme cDNA, Zm-p60.l, která kóduje novou kukuřičnou beta-glukozidázu. Beta-Glukozidáza Zm-p60.l uvolňuje aktivní cytokininy z jejich neaktivníchglukozidů in vitro. Její funkce in vivo může spočívat v zásobování vyvíjejícího se embrya kukuřice aktivními cytokininy. Aminokyselinová sekvence Zm-p60.l obsahuje pět cysteinových zbytků. Navrhujeme zaměnit cysteinové zbytky jinými aminokyselinami metodou místně cílené mutageneze. Analýza změn v katalytických a strukturních vlastnostech enzymu umožní vyvodit závěry o významu jednotlivých cysteinových zbytků pro aktivitu a architekturu enzymu. U mutant se ztracenou enzymatickou aktivitou budeme vyhledávat, metodou náhodné mutageneze, mutace v jiných místech molekuly, které povedou k obnovení enzymatické aktivity. Takto získáme nové poznatky o plasticitě molekuly enzymu.

R&D category

—

CEP classification - main branch

EB - Genetics and molecular biology

CEP - secondary branch

CE - Biochemistry

CEP - another secondary branch

EI - Biotechnology and bionics

OECD FORD - equivalent branches <br>(according to the <a href="http://www.vyzkum.cz/storage/att/E6EF7938F0E854BAE520AC119FB22E8D/Prevodnik_oboru_Frascati.pdf">converter</a>)

10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)<br>10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)<br>10605 - Developmental biology<br>10608 - Biochemistry and molecular biology<br>10609 - Biochemical research methods<br>20801 - Environmental biotechnology<br>20802 - Bioremediation, diagnostic biotechnologies (DNA chips and biosensing devices) in environmental management<br>20803 - Environmental biotechnology related ethics<br>20901 - Industrial biotechnology<br>20902 - Bioprocessing technologies (industrial processes relying on biological agents to drive the process) biocatalysis, fermentation<br>20903 - Bioproducts (products that are manufactured using biological material as feedstock) biomaterials, bioplastics, biofuels, bioderived bulk and fine chemicals, bio-derived novel materials<br>30101 - Human genetics<br>30401 - Health-related biotechnology<br>30402 - Technologies involving the manipulation of cells, tissues, organs or the whole organism (assisted reproduction)<br>30403 - Technologies involving identifying the functioning of DNA, proteins and enzymes and how they influence the onset of disease and maintenance of well-being (gene-based diagnostics and therapeutic interventions [pharmacogenomics, gene-based therapeutics])<br>30404 - Biomaterials (as related to medical implants, devices, sensors)<br>30405 - Medical biotechnology related ethics<br>40401 - Agricultural biotechnology and food biotechnology<br>40402 - GM technology (crops and livestock), livestock cloning, marker assisted selection, diagnostics (DNA chips and biosensing devices for the early/accurate detection of diseases) biomass feedstock production technologies, biopharming<br>40403 - Agricultural biotechnology related ethics

Provider evaluation

U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)

Project results evaluation

Byly identifikovány skupiny cysteinových zbytků, které se podílejí na enzymatické aktivitě a mají úlohu v utváření architektury beta-glukozidázy Zm-p60.1. Byly získány poznatky o plasticitě molekuly enzymu s ohledem na uchování kvarterní struktury.

Realization period - beginning

Jan 1, 1996

Realization period - end

Jan 1, 1998

Project status

U - Finished project

Latest support payment

—

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Data delivery code

CEP/1999/AV0/AV09IA/V/3:3

Data delivery date

—

Total approved costs

2,945 thou. CZK

Public financial support

1,899 thou. CZK

Other public sources

0 thou. CZK

Non public and foreign sources

0 thou. CZK