Role of Na/H antiporters in the physiology of yeast cells
Project goals
In the moderately halotolerant yeast S. cerevisiae, the main transport system for sodium efflux is a Na-ATPase, wheareas the Na/H antiporter seems to be involved in sodium efflux only marginally. On the other hand, Na/H antiporters are the main sodium-eliminating systems in both halosensitive (S.pombe) and halotolerant (Z. rouxii) yeasts. Eventhough the primary structure of all three antiporters is highly similar, their roles and activities are probably different. To elucidate their roles we plan to clone and tag corresponding genes in a auitable vector, and express them in a S. cerevisiae strain lacking its own sodium transport systems. In resulting transformants, the tolerances to (1) alkaline cations, (2) to changes of pH, and (3) to osmotic stresswill be estimated. In order to characterise the cell distribution, biogenesis and degradation of tagged antiporters, they will be expressed in a serie of S. cerevisiae mutant strains, and visualised by immunofluorescence techniques.
Keywords
yeast plasma membraneNa/H antiporteralkali metal cationspotassium homeostasisregulation of cell volumeregulation of intracellular pH
Public support
Provider
Academy of Sciences of the Czech Republic
Programme
Grants of distinctly investigative character focused on the sphere of research pursued at present particularly in the Academy of Sciences of the Czech Republic
Call for proposals
SAV0-AB2000
Main participants
Fyziologický ústav AV ČR, v. v. i.
Contest type
VS - Public tender
Contract ID
—
Alternative language
Project name in Czech
Úloha přenášečů Na/H v buněčné fyziologii kvasinek
Annotation in Czech
V kvasince S. cerevisiae je hlavním systémem zprostředkujícím výstup toxických iontů Na z buněk Na-ATPasa, zatímco antiportní přenášeč Na/H se na exportu sodíku v této kvasince podílí jen okrajově. Na druhé straně jsou antiportery Na/H hlavními systémy eliminujícími ionty Na jak v halosensitivních (S. pombe) tak i vysoce halotolerantních (Z. touxii) kvasinkách. Přestože je primární struktura všech tří přenášečů velmi podobná, zdá se, že jejich aktivita, substrátová specifita a úloha v buňkách může být značně rozdílná. Pro charakterizaci vlastností a funkce jednotlivých přenašečů budou geny kódující tyto proteiny klonovány do expresního vektoru, označeny epitopem a exprimovány v kmeni S. cerevisiae postrádajícím vlastní přenašeče. U transformantů bude testována tolerance k iontům alkalických kovů, změnám pH a osmotickému šoku. Biogeneze, buněčná distribude a degradace jednotlivých přenášečů bude sledována pomocí imunofluorescenčních technik.§
Scientific branches
R&D category
—
CEP classification - main branch
EB - Genetics and molecular biology
CEP - secondary branch
EE - Microbiology, virology
CEP - another secondary branch
CE - Biochemistry
10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)
10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)
10605 - Developmental biology
10606 - Microbiology
10607 - Virology
10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
30101 - Human genetics
Completed project evaluation
Provider evaluation
V - Vynikající výsledky projektu (s mezinárodním významem atd.)
Project results evaluation
Na/H antiportery nižších eukaryot se podle substrátové specifity a funkce dělí na systémy: 1) s detoxikační úlohou (eliminace nadbytku Na a Li z buněk), 2) se širokou substrátovou specifitou podílející se také na regulaci buněčného objemu a pH.
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 2000
Realization period - end
Jan 1, 2002
Project status
U - Finished project
Latest support payment
—
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP/2003/AV0/AV03IA/U/N/5:3
Data delivery date
Oct 27, 2004
Finance
Total approved costs
2,443 thou. CZK
Public financial support
997 thou. CZK
Other public sources
1,446 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK
Basic information
Recognised costs
2 443 CZK thou.
Public support
997 CZK thou.
40%
Provider
Academy of Sciences of the Czech Republic
CEP
EB - Genetics and molecular biology
Solution period
01. 01. 2000 - 01. 01. 2002