Investigation of the mechanism of membrane translocation of the adenylate cyclase toxin
Public support
Provider
Academy of Sciences of the Czech Republic
Programme
Grants of distinctly investigative character focused on the sphere of research pursued at present particularly in the Academy of Sciences of the Czech Republic
Call for proposals
—
Main participants
Mikrobiologický ústav AV ČR, v. v. i.<br>Univerzita Karlova / Přírodovědecká fakulta
Contest type
VS - Public tender
Contract ID
—
Alternative language
Project name in Czech
Studium mechanismu průniku adenylát-cyklázového toxinu přes biologické membrány
Annotation in Czech
Průnik adenylát-cyklázového toxinu (ACT) do cílových buněk je jedinečným příkladem spontánní translokace proteinů přímo přes buněčnou membránu. Objasnění jeho mechanismu má značný význam pro pochopení interakce proteinů s biologickými membránami a je základním cílem tohoto projektu. Využijeme výsledků předchozích studií, ve kterých jsme identifikovali funkční domény ACT a připravili sadu mutant, nesoucích v přesně definovaných pozicích epitopy pro monoklonální protilátky a unikátní cysteinové zbytky prospecifické značení ACT fluorescenčními sondami a biotinem. Ty použijeme pro studium membránové topologie, eligomerisace a dynamiky interakce ACT s umělými a biologickými membránami, pomocí fluorescenční spektroskopie a imunodetekce. Strukturu toxinu budeme studovat technikami dvourozměrné krystalizace a elektron-mikroskopické visualisace ACT v umělých membránách. Současně budeme identifikovat membránové domény ACT pomocí specifického značení foto-aktivovatelnými lipidy.
Scientific branches
R&D category
—
CEP classification - main branch
CE - Biochemistry
CEP - secondary branch
EB - Genetics and molecular biology
CEP - another secondary branch
EE - Microbiology, virology
OECD FORD - equivalent branches <br>(according to the <a href="http://www.vyzkum.cz/storage/att/E6EF7938F0E854BAE520AC119FB22E8D/Prevodnik_oboru_Frascati.pdf">converter</a>)
10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)<br>10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)<br>10605 - Developmental biology<br>10606 - Microbiology<br>10607 - Virology<br>10608 - Biochemistry and molecular biology<br>10609 - Biochemical research methods<br>30101 - Human genetics
Completed project evaluation
Provider evaluation
V - Vynikající výsledky projektu (s mezinárodním významem atd.)
Project results evaluation
Byly identifikovány klíčové struktury adenylát-cyklázového toxinu odpovídající za jeho vazbu na buněčný receptor leukocytů CD11b/CD18,za inserci a translokaci AC domény do buněk,tvorbu a iontovou selektivitu membrán. kanálů a indukcí vstupu vápníku.
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 1999
Realization period - end
Jan 1, 2003
Project status
U - Finished project
Latest support payment
—
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP/2004/AV0/AV04IA/U/N/3:2
Data delivery date
Oct 13, 2004
Finance
Total approved costs
7,321 thou. CZK
Public financial support
4,975 thou. CZK
Other public sources
1,777 thou. CZK
Non public and foreign sources
569 thou. CZK