Development and Application of Chromatographic Methods for the Determination of a Broad Spectrum of Cannabinoids and Cholesterol in Various Samples of Biological Origin

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00027014%3A_____%2F25%3A10006353" target="_blank" >RIV/00027014:_____/25:10006353 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Vývoj a aplikace chromatografických metod pro stanovení širokého spektra kanabinoidů a cholesterolu v různých vzorcích biologického původu

Original language description

Cílem studie bylo vyvinout metodu plynové chromatografie spojenou s hmotností spektrometrií (GC-MS) a kapalinové chromatografie s detekcí ve fotodiodovém poli (HPLC-DAD) pro stanovení nederivatizovaných neutrálních kanabinoidů (CBDs-N), kanabinoidů ve formě kyselin (CBDs-A) a cholesterolu (Chol). Důraz byl kladen i na srovnání metody GC-MS s metodou HPLC-DAD. Byla vyvinuta metoda pro současné stanovení 16 fyziologicky významných kanabinoidů (CBDs) pomocí HPLC-DAD a 17 CBDs pomocí GC-MS a volného Chol pomocí obou metod v rostlinných a živočišných vzorcích. Předkolonový postup pro analýzu CBDs v rostlinných vzorcích zahrnoval dvě extrakce methanolem a dvě extrakce n-hexanem. Předkolonový postup ve vzorcích živočišného původu (homogenizované zvířecí tkáně, vaječný žloutek slepic a výkaly), kde byl analyzován Chol společně s CBDs, sestával ze čtyř n-hexanových extrakcí. Methanol a n-hexan se ukázaly jako vhodná rozpouštědla pro extrakci CBDs a Chol vyskytujících se v testovaných biologických vzorcích v širokém koncentračním rozmezí. Všechny vzorky byly analyzovány pomocí HPLC-DAD gradientovou elucí acetonitrilem s kyselinou mravenčí, vodou s kyselinou mravenčí a methanolem. Tato metoda umožnila selektivní, přesnou, přesnou a citlivou kvantifikaci CBDs a Chol ve standardních vzorcích a ve vzorcích rostlin a zvířat. Citlivá a selektivní kvantifikace CBDs je důležitá, zejména v potravinářských výrobcích, protože přesné sledování psychotropních CBDs je obzvláště důležité. Kombinace dlouhého teplotního programu a postupného teplotního nárůstu byla použita u hmotnostní spektrometrie, aby se předešlo problémům vyplývajícím z překrývání píků mezi CBDs a Chol. CBDs-A prošly dekarboxylací na CBD-N během analýzy GC-MS a tedy přímým nástřikem byl odezvou sumární pík pro obě formy CBDs-N a CBDs-A. Extrakcí pomocí NaOH byly odstraněny CBDs-A formy a bylo možné analyzovat pouze neutrální formy CBDs. V extrahovaných vzorcích nebyly pozorovány žádné ztráty CBDs-N roztokem NaOH. GC-MS analýzy vzorků před a po extrakci roztokem NaOH umožnily kvantifikaci CBDs-A a CBDs-N. Použití metody C18 HPLC-DAD umožnilo simultánní stanovení CBDs-N a CBDs-A. Ve srovnání s metodou C18 HPLC-DAD technika GC-MS nabídla zlepšenou citlivost, přesnost, specificitu a dostatečnou separaci nederivatizovaných CBDs a Chol z biologických materiálů endogenního původu, zejména u vzorků konopí a slepičího vaječného žloutku. Vědeckou novinkou této studie je aplikace metody GC-MS pro kvantifikaci nederivatizovaných forem CBDs-A, CBDs-N a Chol.

Czech name

Vývoj a aplikace chromatografických metod pro stanovení širokého spektra kanabinoidů a cholesterolu v různých vzorcích biologického původu

Czech description

Cílem studie bylo vyvinout metodu plynové chromatografie spojenou s hmotností spektrometrií (GC-MS) a kapalinové chromatografie s detekcí ve fotodiodovém poli (HPLC-DAD) pro stanovení nederivatizovaných neutrálních kanabinoidů (CBDs-N), kanabinoidů ve formě kyselin (CBDs-A) a cholesterolu (Chol). Důraz byl kladen i na srovnání metody GC-MS s metodou HPLC-DAD. Byla vyvinuta metoda pro současné stanovení 16 fyziologicky významných kanabinoidů (CBDs) pomocí HPLC-DAD a 17 CBDs pomocí GC-MS a volného Chol pomocí obou metod v rostlinných a živočišných vzorcích. Předkolonový postup pro analýzu CBDs v rostlinných vzorcích zahrnoval dvě extrakce methanolem a dvě extrakce n-hexanem. Předkolonový postup ve vzorcích živočišného původu (homogenizované zvířecí tkáně, vaječný žloutek slepic a výkaly), kde byl analyzován Chol společně s CBDs, sestával ze čtyř n-hexanových extrakcí. Methanol a n-hexan se ukázaly jako vhodná rozpouštědla pro extrakci CBDs a Chol vyskytujících se v testovaných biologických vzorcích v širokém koncentračním rozmezí. Všechny vzorky byly analyzovány pomocí HPLC-DAD gradientovou elucí acetonitrilem s kyselinou mravenčí, vodou s kyselinou mravenčí a methanolem. Tato metoda umožnila selektivní, přesnou, přesnou a citlivou kvantifikaci CBDs a Chol ve standardních vzorcích a ve vzorcích rostlin a zvířat. Citlivá a selektivní kvantifikace CBDs je důležitá, zejména v potravinářských výrobcích, protože přesné sledování psychotropních CBDs je obzvláště důležité. Kombinace dlouhého teplotního programu a postupného teplotního nárůstu byla použita u hmotnostní spektrometrie, aby se předešlo problémům vyplývajícím z překrývání píků mezi CBDs a Chol. CBDs-A prošly dekarboxylací na CBD-N během analýzy GC-MS a tedy přímým nástřikem byl odezvou sumární pík pro obě formy CBDs-N a CBDs-A. Extrakcí pomocí NaOH byly odstraněny CBDs-A formy a bylo možné analyzovat pouze neutrální formy CBDs. V extrahovaných vzorcích nebyly pozorovány žádné ztráty CBDs-N roztokem NaOH. GC-MS analýzy vzorků před a po extrakci roztokem NaOH umožnily kvantifikaci CBDs-A a CBDs-N. Použití metody C18 HPLC-DAD umožnilo simultánní stanovení CBDs-N a CBDs-A. Ve srovnání s metodou C18 HPLC-DAD technika GC-MS nabídla zlepšenou citlivost, přesnost, specificitu a dostatečnou separaci nederivatizovaných CBDs a Chol z biologických materiálů endogenního původu, zejména u vzorků konopí a slepičího vaječného žloutku. Vědeckou novinkou této studie je aplikace metody GC-MS pro kvantifikaci nederivatizovaných forem CBDs-A, CBDs-N a Chol.

Type

O - Miscellaneous

CEP classification

—

OECD FORD branch

40201 - Animal and dairy science; (Animal biotechnology to be 4.4)

Project

—

Continuities

I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Publication year

2025

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů