Identification and quantitative determination of analytes B - vitamins and vitamin C by liquid chromatography with high resolution mass spectrometry (LC-MS/MS/HR)) in feed samples

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00027162%3A_____%2F19%3AN0000371" target="_blank" >RIV/00027162:_____/19:N0000371 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Identifikace a kvantitativní stanovení analytu vitamínů skupiny B a vitamínu C metodou kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií s vysokým rozlišením (LC-MS/MS(HR)) v krmivech

Original language description

"Byla vyvinutá nová analytická metoda pro stanovení analytů Thiaminu (B1), Riboflavinu (B2), Kyseliny nicotinové (B3), Pantothenatu (B5), Pyridoxinu (B6), Kyseliny listové (B9) a Cyanocobalaminu (B12) a Kyseliny L-askorbové (C) na základě kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií s vysokým rozlišením (LC-MS/MS(HR)) ve vzorcích různých druhů krmiv. Použití tandemového hybridního hmotnostního analyzátoru s vysokým rozlišením pro jednoznačnou identifikaci výše uvedeného analytu a konfirmační stanovení s využitím kritéria mass acurracy (MA), je zcela nové řešení a podle znalostí autora nebylo dosud publikováno ve vědecké literatuře. Vyvinutá metodika je dále vysoce citlivá pro kvantitativní stanovení analytu, jak bylo prokázáno validací a splněním všech parametrů požadovaných směrnicí 657/2002/EC pro stanovení reziduí organických sloučenin v potravinách, pro konfirmační metody. Postup přípravy vzorku byl modifikován tak, aby celá procedura zpracování vzorků byla maximálně efektivní s minimálním potřebným časem na přípravu a náročnost na manuální práci kvalifikovaného pracovníka v analytické laboratoři."

Czech name

Identifikace a kvantitativní stanovení analytu vitamínů skupiny B a vitamínu C metodou kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií s vysokým rozlišením (LC-MS/MS(HR)) v krmivech

Czech description

"Byla vyvinutá nová analytická metoda pro stanovení analytů Thiaminu (B1), Riboflavinu (B2), Kyseliny nicotinové (B3), Pantothenatu (B5), Pyridoxinu (B6), Kyseliny listové (B9) a Cyanocobalaminu (B12) a Kyseliny L-askorbové (C) na základě kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií s vysokým rozlišením (LC-MS/MS(HR)) ve vzorcích různých druhů krmiv. Použití tandemového hybridního hmotnostního analyzátoru s vysokým rozlišením pro jednoznačnou identifikaci výše uvedeného analytu a konfirmační stanovení s využitím kritéria mass acurracy (MA), je zcela nové řešení a podle znalostí autora nebylo dosud publikováno ve vědecké literatuře. Vyvinutá metodika je dále vysoce citlivá pro kvantitativní stanovení analytu, jak bylo prokázáno validací a splněním všech parametrů požadovaných směrnicí 657/2002/EC pro stanovení reziduí organických sloučenin v potravinách, pro konfirmační metody. Postup přípravy vzorku byl modifikován tak, aby celá procedura zpracování vzorků byla maximálně efektivní s minimálním potřebným časem na přípravu a náročnost na manuální práci kvalifikovaného pracovníka v analytické laboratoři."

Type

N_metC - Methodology certified by the authorised body

CEP classification

—

OECD FORD branch

10406 - Analytical chemistry

Project

<a href="/en/project/QJ1530107" target="_blank" >QJ1530107: Methods for identification, traceability and authenticity verification of feed mixtures and food containing components of animal origin</a><br>

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Publication year

2019

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Internal product ID

CM 106/2018

Regulation ID

UKZUZ 005063/2019

Technical parameters

Pro stanovení parametrů kalibračních křivek a hodnot CCα, CCβ a LOD, LOQ byl rozsah 1 – 160 µg.g-1 pro thiamin, riboflavin, kyselinu nikotinovou a nikotinicamid, pantothenát, pyridoxin a kyselinu listovou a koncentrace interních standardů byla 1-100 µg.g-1, podle analytu. Kalibrační křivky byly připraveny pro koncentrační hladiny 1, 10, 20, 40, 80, 160 µg.g-1 standardů (koncentrace IS byly konstantní) a změřeny ve 3 různých dnech. Kalibrační křivka pro cyanocobalamin byla v rozsahu 0,02 – 0,2 µg.g-1 (koncentrační hladiny: 0,02; 0,04; 0,08; 0,1; 0,16 a 0,2) a pro L-askorbovou kyselinu v koncentračním rozsahu 1 µg.g-1 – 500 µg.g-1 (koncentrační hladiny: 1, 5, 25, 125, 250 a 500). Na každé koncentrační hladině bylo připraveno 6 modelových vzorků a každý vzorek byl změřen 2x. Zjištěné reálné koncentrace pro vitamíny B a C v krmivech jsou následující: u krmiv pro domácí mazlíčky (psy, kočky) nejsou stanovené normativně Doporučené denní dávky pro vitamíny skupiny B a vitamín C. Metodika je použitelná pro stanovení pro stanovení thiaminu (B1), riboflavinu (B2) kyseliny nikotinové a nikotinikamidu (B3), pantothenatu (B5), pyridoxinu (B6) a kyseliny listové (B9) v koncentračním rozsahu 1 µg.g-1 – 160 µg.g-1 (ppm), cyanocobalaminu v koncentračním rozsahu 0,02 µg.g-1 – 0,2 µg.g-1 (ppm) a L-ascorbic acid v koncentračním rozsahu 1 µg.g-1 – 500 µg.g-1 (ppm). Zjištěné obsahy těchto vitamínů pocházejí z krmiv získaných z tržní sítě specializovaných „pet“ obchodů v ČR a EU a rovněž je výrobci těchto krmiv nejčastěji uvádějí ve svých doporučeních.

Economical parameters

Ekonomické přínosy pro laboratoř: Při běžné ceně 4.000,- až 5.500,- Kč za jednu analýzu biologických vzorků pomocí systémů LC-MS/MS (vysoké náklady na analytické zařízení, odpisy a mzdy vysoce kvalifikovaných pracovníků) se přínosy dají vyčíslit jednoduchým vynásobením počtem vzorků zpracovaných v laboratoři za určité časové období, například za 100 analyzovaných vzorků za rok by to byl přínos 400 tis. Kč, - obecně ale platí, že ceny se tvoří dohodou a v tomto případě platí, že cena za jednu analýzu se významně sníží, pokud bude objednávka smluvená na více vzorků, například cena pro významného zákazníka může být stanovena na 1.500,- Kč při zakázce 100 vzorků ročně, pak ekonomický přínos bude 150 tisíc za rok. Budoucí ekonomické přínosy pro objednavatele: V tomto případě se nedají ekonomické přínosy přesněji vyčíslit, protože metodika byla vyvinutá především jako rozhodčí (konfirmační) pro situace, kdy bude požadováno exaktní potvrzení a rozhodnutí (ale může být i rutině využívána).

Certification body designation

Ústřední kontrolní a zkušební ústav zemědělský, Hroznová 2, 656 06 Brno

Date of certification

—

Method of use

B - Výsledek je využíván orgány státní nebo veřejné správy