Determination of the age of bed bugs (Cimex lectularius) through pteridines: methodical pitfalls

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00216224%3A14310%2F18%3A00107157" target="_blank" >RIV/00216224:14310/18:00107157 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Určení věku štěnice domácí (Cimex lectularius) prostřednictvím pteridinů: metodická úskalí

Original language description

Práce z posledních několika desetiletí ukazují, že u různých druhů hmyzu lze věk jedince stanovit pomocí koncentrace pteridinů (fluorescenčních pigmentů) v hlavě a/nebo oku. U štěnice domácí (C. lectularius) se věk samic a s ním se měnící schopnost uchovávat životaschopné spermie jeví jako významný parametr při studiu ekologické speciace a reprodukční izolace dvou hostitelských linií parazitujících člověka a netopýry. Doposud se žádná studie určení věku štěnic nevěnovala a ve vlastním stanovení věku panuje řada metodických nesrovnalostí. S ohledem na potřebnou citlivost detekce byla zvolena metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC). První obtíží bylo vybrání vhodných pteridinů. Autoři podobných studií je obvykle volí podle dostupných standardů a méně již podle množství jednotlivých pteridinů, které se mezi taxony liší. Dále bylo nezbytné zvolit nejvhodnější typ extrakčního média, neboť jeho pH značně ovlivňuje kvalitu extrakce. Vzhledem k tomu, že cílem této práce je určení věku jedince, bylo nezbytné ověřit, zda se v jediné hlavičce štěnice nachází dostatečné množství pteridinů pro analýzu. Pteridiny jsou některými autory označovány jako oční pigmenty, nicméně preparace oka štěnice se ukázala být časově náročná a mnohem snazší a efektivnější je použití celé hlavičky. Bylo tedy nezbytné zjistit, zda se pteridiny nachází v celé hlavě či pouze v oku. Posledním úskalím bylo, že veškerá literatura uvádí, že pteridiny jsou citlivé na světlo, takže extrakci je nutné provádět za velmi omezených světelných podmínek. Průběžné výsledky ukazují, že použitelnými pteridiny pro identifikaci věku štěnice domácí jsou 6-biopterin, isoxanthopterin a leucopterin. Zároveň se tyto pteridiny nacházejí především v očích. Mezi přípravou za světla a za tmy nebyl zjištěn významný rozdíl ani u jednoho z pěti testovaných pteridinů. Extrakci je tedy, na rozdíl od většiny publikovaných postupů, možné provádět za světla, což značně usnadňuje přípravu vzorků a zároveň i sníží chybovost.

Czech name

Určení věku štěnice domácí (Cimex lectularius) prostřednictvím pteridinů: metodická úskalí

Czech description

Práce z posledních několika desetiletí ukazují, že u různých druhů hmyzu lze věk jedince stanovit pomocí koncentrace pteridinů (fluorescenčních pigmentů) v hlavě a/nebo oku. U štěnice domácí (C. lectularius) se věk samic a s ním se měnící schopnost uchovávat životaschopné spermie jeví jako významný parametr při studiu ekologické speciace a reprodukční izolace dvou hostitelských linií parazitujících člověka a netopýry. Doposud se žádná studie určení věku štěnic nevěnovala a ve vlastním stanovení věku panuje řada metodických nesrovnalostí. S ohledem na potřebnou citlivost detekce byla zvolena metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC). První obtíží bylo vybrání vhodných pteridinů. Autoři podobných studií je obvykle volí podle dostupných standardů a méně již podle množství jednotlivých pteridinů, které se mezi taxony liší. Dále bylo nezbytné zvolit nejvhodnější typ extrakčního média, neboť jeho pH značně ovlivňuje kvalitu extrakce. Vzhledem k tomu, že cílem této práce je určení věku jedince, bylo nezbytné ověřit, zda se v jediné hlavičce štěnice nachází dostatečné množství pteridinů pro analýzu. Pteridiny jsou některými autory označovány jako oční pigmenty, nicméně preparace oka štěnice se ukázala být časově náročná a mnohem snazší a efektivnější je použití celé hlavičky. Bylo tedy nezbytné zjistit, zda se pteridiny nachází v celé hlavě či pouze v oku. Posledním úskalím bylo, že veškerá literatura uvádí, že pteridiny jsou citlivé na světlo, takže extrakci je nutné provádět za velmi omezených světelných podmínek. Průběžné výsledky ukazují, že použitelnými pteridiny pro identifikaci věku štěnice domácí jsou 6-biopterin, isoxanthopterin a leucopterin. Zároveň se tyto pteridiny nacházejí především v očích. Mezi přípravou za světla a za tmy nebyl zjištěn významný rozdíl ani u jednoho z pěti testovaných pteridinů. Extrakci je tedy, na rozdíl od většiny publikovaných postupů, možné provádět za světla, což značně usnadňuje přípravu vzorků a zároveň i sníží chybovost.

Type

O - Miscellaneous

CEP classification

—

OECD FORD branch

10613 - Zoology

Project

<a href="/en/project/GC18-08468J" target="_blank" >GC18-08468J: The role of sperm adaptation and sperm plasticity in ecological speciation</a><br>

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Publication year

2018

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů