Imaging immunohistochemical method for labeling spheroid sections using gold nanoparticles by laser ablation and inductively coupled plasma mass spectrometry
The result's identifiers
Result code in IS VaVaI
<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00216224%3A14310%2F21%3A00119491" target="_blank" >RIV/00216224:14310/21:00119491 - isvavai.cz</a>
Result on the web
—
DOI - Digital Object Identifier
—
Alternative languages
Result language
čeština
Original language name
Zobrazovací imunohistochemická metoda pro značení řezů sferoidů s využitím zlatých nanočástic pomocí laserové ablace a hmotnostní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem
Original language description
Sferoidy jsou používané 3D buňkové modely, které dokáží reprezentovat skutečné prostředí nádorové tkáně. Jsou tak dobrým modelem pro imunohistochemické (IHC) značení a 2D nebo 3D zobrazování cílového proteinu v řezech tkání. Rozložení proliferujících buněk ve vnějších částech, kde je dostatek živin a kyslíku, a výskytem nekrotických buněk blíže středu sferoidu tedy připomíná mikroprostředí nádoru. Jedním z markerů proliferace je protein Ki-67, na jehož detekci pomocí fluorescenční mikroskopie se rutinně používá značení primární a sekundární protilátkou s fluoroforem. Často je také využívána tvorba velmi pevné vazby avidin-biotin, kdy je jeden z partnerů označen detekční značkou. Označením proteinu Ki-67 pomocí zlaté nanočástice (AuNP) o definované velikosti umožňuje vysoce citlivé stanovení tohoto markeru pomocí laserové ablace spojené s hmotnostní spektrometrií s indukčně vázanou plazmou (LA ICP MS). V tomto příspěvku je popsán vývoj metody IHC značení řezů sferoidu tvořených buňkami adenokarcinomu tlustého střeva z linie HT-29. Pozornost je věnována zejména eliminaci nespecifických interakcí nanočástic pomocí proteinových či neproteinových blokačních roztoků. Jsou využity 20nm AuNP s adsorbovaným nebo kovalentně navázaným streptavidinem.
Czech name
Zobrazovací imunohistochemická metoda pro značení řezů sferoidů s využitím zlatých nanočástic pomocí laserové ablace a hmotnostní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem
Czech description
Sferoidy jsou používané 3D buňkové modely, které dokáží reprezentovat skutečné prostředí nádorové tkáně. Jsou tak dobrým modelem pro imunohistochemické (IHC) značení a 2D nebo 3D zobrazování cílového proteinu v řezech tkání. Rozložení proliferujících buněk ve vnějších částech, kde je dostatek živin a kyslíku, a výskytem nekrotických buněk blíže středu sferoidu tedy připomíná mikroprostředí nádoru. Jedním z markerů proliferace je protein Ki-67, na jehož detekci pomocí fluorescenční mikroskopie se rutinně používá značení primární a sekundární protilátkou s fluoroforem. Často je také využívána tvorba velmi pevné vazby avidin-biotin, kdy je jeden z partnerů označen detekční značkou. Označením proteinu Ki-67 pomocí zlaté nanočástice (AuNP) o definované velikosti umožňuje vysoce citlivé stanovení tohoto markeru pomocí laserové ablace spojené s hmotnostní spektrometrií s indukčně vázanou plazmou (LA ICP MS). V tomto příspěvku je popsán vývoj metody IHC značení řezů sferoidu tvořených buňkami adenokarcinomu tlustého střeva z linie HT-29. Pozornost je věnována zejména eliminaci nespecifických interakcí nanočástic pomocí proteinových či neproteinových blokačních roztoků. Jsou využity 20nm AuNP s adsorbovaným nebo kovalentně navázaným streptavidinem.
Classification
Type
O - Miscellaneous
CEP classification
—
OECD FORD branch
10406 - Analytical chemistry
Result continuities
Project
<a href="/en/project/GA21-12262S" target="_blank" >GA21-12262S: Nanoparticle probes for mass spectrometry imaging</a><br>
Continuities
P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>S - Specificky vyzkum na vysokych skolach
Others
Publication year
2021
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů