Utilization of immobilized lysozyme for identification of bacterial proteins by mass spectrometry
The result's identifiers
Result code in IS VaVaI
<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00216275%3A25310%2F11%3A39881877" target="_blank" >RIV/00216275:25310/11:39881877 - isvavai.cz</a>
Result on the web
—
DOI - Digital Object Identifier
—
Alternative languages
Result language
čeština
Original language name
VYUŽITÍ IMOBILIZOVANÉHO LYSOZYMU PRO IDENTIFIKACI BAKTERIÁLNÍCH PROTEINŮ HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIÍ
Original language description
Cílem této práce bylo připravit účinný nosič s imobilizovaným enzymem lysozymem pro efektivní narušení buněčné stěny G+ bakterií a získat tak materiál pro rychlou a reprodukovatelnou analýzu bakteriálního proteomu hmotnostní spektrometrií. Bylo nutné vytipovat a zavést jednoduchou metodu pro stanovení aktivity enzymu lysozymu a následně připravit nosič, kde bude enzym kovalentně vázán tak, aby jeho aktivita a stabilita byla zachována i během opakovaného použití. Pro naše účely se osvědčila citlivá spektrofluorimetrická metoda pomocí 4-methylumbelliferyl-beta-D-N,N',N''-triacetylchito-triosidu. Lysozym byl imobilizován na magnetické částice s různými funkčními skupinami, velikostí částic i porozitou. Na základě výsledků byl vybrán nejvhodnější nosič, ukterého byla stanovena skladovací a operační stabilita. Vázaná i volná forma enzymu byly poté použity k přípravě vzorků G+bakterií určených k MALDI-TOF-MS identifikaci a výsledky byly porovnány s tradiční přípravou bakteriálních vzorků pr
Czech name
VYUŽITÍ IMOBILIZOVANÉHO LYSOZYMU PRO IDENTIFIKACI BAKTERIÁLNÍCH PROTEINŮ HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIÍ
Czech description
Cílem této práce bylo připravit účinný nosič s imobilizovaným enzymem lysozymem pro efektivní narušení buněčné stěny G+ bakterií a získat tak materiál pro rychlou a reprodukovatelnou analýzu bakteriálního proteomu hmotnostní spektrometrií. Bylo nutné vytipovat a zavést jednoduchou metodu pro stanovení aktivity enzymu lysozymu a následně připravit nosič, kde bude enzym kovalentně vázán tak, aby jeho aktivita a stabilita byla zachována i během opakovaného použití. Pro naše účely se osvědčila citlivá spektrofluorimetrická metoda pomocí 4-methylumbelliferyl-beta-D-N,N',N''-triacetylchito-triosidu. Lysozym byl imobilizován na magnetické částice s různými funkčními skupinami, velikostí částic i porozitou. Na základě výsledků byl vybrán nejvhodnější nosič, ukterého byla stanovena skladovací a operační stabilita. Vázaná i volná forma enzymu byly poté použity k přípravě vzorků G+bakterií určených k MALDI-TOF-MS identifikaci a výsledky byly porovnány s tradiční přípravou bakteriálních vzorků pr
Classification
Type
D - Article in proceedings
CEP classification
CB - Analytical chemistry, separation
OECD FORD branch
—
Result continuities
Project
<a href="/en/project/GA203%2F09%2F0857" target="_blank" >GA203/09/0857: New analytical approaches for identification of proteins with significant attributes for virulence and pathogenity of bacteria</a><br>
Continuities
P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)<br>S - Specificky vyzkum na vysokych skolach
Others
Publication year
2011
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data specific for result type
Article name in the collection
Sborník příspěvků ze semináře Monitorování cizorodých látek v životním prostredí XIII.
ISBN
978-80-7395-450-5
ISSN
—
e-ISSN
—
Number of pages
11
Pages from-to
51-62
Publisher name
Univerzita Pardubice
Place of publication
Pardubice
Event location
Luka nad Jihlavou
Event date
Sep 20, 2011
Type of event by nationality
CST - Celostátní akce
UT code for WoS article
—