New method of plant mitochondria isolation and sub-fractionation for proteomic analyses

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F61389030%3A_____%2F04%3A00109145" target="_blank" >RIV/61389030:_____/04:00109145 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

angličtina

Original language name

New method of plant mitochondria isolation and sub-fractionation for proteomic analyses

Original language description

A new method for the isolation and sub-fractionation of mitochondria from plant tissues is described. This method was used for the analysis of proteins isolated from a pure total mitochondrial fraction and of protein complexes obtained from two mitochondrial sub-fractions, membrane-bound and matrix, from in vitro cultivated tobacco pollen tubes. The method comprised: a new plant tissue homogenization procedure: differential centrifugation of the homogenates in a Percoll gradient; mitochondria immobilization together with Percoll removal by filtration through an uncharged nylon membrane. Mitochondria trapped on the nylon membrane were used for (1) rapid protein extraction; (2) quantitative phenol-chloroform protein extraction; (3) mitochondria sub-fractionation into membrane-bound and matrix fractions. The new method was found to be more efficient than previously published protocols, requiring the use of as little as 180 mg of fresh plant material. It is very fast, reliable, and suit...

Czech name

Nová metoda isolace a subfrakcionace rostlinných mitochondrií vhodná pro proteomické analýzy

Czech description

V článku popisujeme novou metodu isolace a subfrakcionace mitochondrií z rostlinných pletiv. Metoda byla úspěšně použita k analýze bílkovin získaných z celkové mitochondriální frakce a bílkovinných komplexů získaných z mitochondriálních subfrakcí, membránové a rozpustné, z in vitro kultivovaných pylových láček tabáku (Nicotiana tabacum). Popsaná metoda zahrnuje: nový způsob homogenizace rostlinného materiálu; diferenciální centrifugaci homogenátu v Percollovém gradientu a imobilizaci mitochondrií spolus odstraněním Percollu filtrací přes neutrální nylonovou membránu. Mitochondrie uchycené na nylonové membráně byly použity pro (1) rychlou extrakci bílkovin; (2) kvantitativní isolaci bílkovin pomocí fenol/chloroformu a (3) subfrakcionaci mitochondrií namembránovou a rozpustnou (matrix) frakci. Popsaná metoda byla shledána účinnější než dříve popsané postupy zejména pro výrazně menší materiálovou náročnost (čerstvá hmotnost jen 180 mg). Postup je také rychlý, reprodukovatelný a vhod...

Type

J_x - Unclassified - Peer-reviewed scientific article (Jimp, Jsc and Jost)

CEP classification

EB - Genetics and molecular biology

OECD FORD branch

—

Project

<a href="/en/project/LZ1K03018" target="_blank" >LZ1K03018: ÚEB AV ČR - Honys Identification of promotors of microspore-specific genes and their use in plant molecular biology tools</a><br>

Continuities

Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)

Publication year

2004

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Name of the periodical

Plant Science

ISSN

0168-9452

e-ISSN

—

Volume of the periodical

167

Issue of the periodical within the volume

3

Country of publishing house

IE - IRELAND

Number of pages

7

Pages from-to

389-395

UT code for WoS article

—

EID of the result in the Scopus database

—