Nanoskopická organizace a funkce koreceptoru CD4 na povrchu T buněk
Cíle projektu
Glykoprotein CD4 slouží jako koreceptor při aktivaci T buněk jejich hlavním receptorem - TCR. Hlavní funkcí CD4 je přiblížení tyrosin kinázy Lck k signálnímu komplexu receptor-ligand. O organizaci CD4 na plazmatické membráně je známo velmi málo. S využitím technik mikroskopie s vysokým rozlišením a FRET budou zkoumány nanoskopické změny v lokalizaci CD4 na membráně neaktivovaných a aktivovaných T buněk. Význam různých strukturních motivů pro správnou lokalizaci molekul bude testován pomocí mutantů CD4 exprimovaných a analyzovaných v buňkách s minimální expresí endogenního CD4. Zaměříme se rovněž na předpokládaný vliv struktur vyššího řádu (dimerů, dimerů-dimerů a oligomerů) na aktivaci T buněk. Zmapovány budou různé konformační typy molekuly CD4 podílející se na signalizaci T buněk a jejich interakcí s proteinem gp120 viru HIV-1. Získané poznatky by měly prohloubit pochopení funkce CD4 v T buňkách a pomoci zdokonalit design nových imunoterapeutik.
Klíčová slova
T lymphocytesreceptorco-receptorCD4plasma membrane organisationsuper-resolution microscopyfluorescence techniquesHIV
Veřejná podpora
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
Program
Standardní projekty
Veřejná soutěž
Standardní projekty 19 (SGA0201500001)
Hlavní účastníci
Ústav fyzikální chemie J. Heyrovského AV ČR, v. v. i.
Ústav molekulární genetiky AV ČR, v. v. i.Druh soutěže
VS - Veřejná soutěž
Číslo smlouvy
15-06989S
Alternativní jazyk
Název projektu anglicky
Organisation and function of CD4 co-receptor on the surface of T cells at nanoscale
Anotace anglicky
CD4 glycoprotein functions as a co-receptor for the activation of T cells by their main receptor, TCR. The ultimate function of CD4 is the delivery of the proximal tyrosine kinase, Lck, to the receptor-ligand signalling complex. Very little is known about the plasma membrane organisation of CD4 molecules. Using super-resolution microscopy and FRET techniques, we will investigate the changes in localisation of CD4 on resting and activated T cells at nanoscale. To test the importance of various structural motifs for the proper localisation of molecules, CD4 mutants will be expressed and analysed in co-receptor-deficient cells. We will also focus on putative involvement of higher order structures (dimers, dimers-of-dimers and oligomers) in the activation of T cells. Different pools of CD4 molecules involved in TCR signalling and interaction with gp120 during infection by HIV-1 will be mapped. Achieved results should expand our knowledge of CD4 function in T cells with possible effect on improved or novel immunotherapies.
Vědní obory
Kategorie VaV
ZV - Základní výzkum
CEP - hlavní obor
EC - Imunologie
CEP - vedlejší obor
EB - Genetika a molekulární biologie
CEP - další vedlejší obor
—
OECD FORD - odpovídající obory
(dle převodníku)10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)
10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)
10605 - Developmental biology
10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
30101 - Human genetics
30102 - Immunology
Hodnocení dokončeného projektu
Hodnocení poskytovatelem
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Zhodnocení výsledků projektu
Hlavním výsledkem tohoto projektu zaměřeného na analýzu buněčných dějů asociovaných s plazmatickou membránou T-lymfocytů je metodický přístup k charakterizaci molekulární organizace membránových molekul, konkrétně technologie „super-resolution optical fluctuation imaging” (SOFI) publikovaný v Nature Commun. Řešitelé také charakterizovali CD4 dimery/oligomery uplatňující se při aktivaci T-buněk.
Termíny řešení
Zahájení řešení
1. 1. 2015
Ukončení řešení
25. 4. 2019
Poslední stav řešení
U - Ukončený projekt
Poslední uvolnění podpory
5. 4. 2017
Dodání dat do CEP
Důvěrnost údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Systémové označení dodávky dat
CEP20-GA0-GA-U/01:1
Datum dodání záznamu
2. 7. 2020
Finance
Celkové uznané náklady
7 753 tis. Kč
Výše podpory ze státního rozpočtu
7 753 tis. Kč
Ostatní veřejné zdroje financování
0 tis. Kč
Neveřejné tuz. a zahr. zdroje finan.
0 tis. Kč
Základní informace
Uznané náklady
7 753 tis. Kč
Statní podpora
7 753 tis. Kč
100%
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
CEP
EC - Imunologie
Doba řešení
01. 01. 2015 - 25. 04. 2019