Microtubule nucleation in activated mast cells: regulatory role of phosphorylated GIT proteins
Project goals
Mast cells play a crucial role in allergy as well as in innate and adaptive immune responses. Activation of mast cells results in calcium influx, reorganization of microtubules (MT) and degranulation. We have shown that activation leads to calcium-dependent MT nucleation, and that phosphorylated GIT protein form complexes with g-tubulin variants and regulates centrosomal MT nucleation. However, corresponding signaling pathway is unknown. Recently we have found that kinases from PAK and calcium-dependent PKC families can phosphorylate GIT. The aim of this project is to evaluate our hypothesis that phosphorylation of GIT1/2 scaffolding proteins by these kinases is important for modulation of MT nucleation. To this end we propose to determine kinase isoforms involved in regulation of MT nucleation and MT-based granule transport, specify their cellular localization, identify phosphorylation sites on GITs and their importance for MT nucleation, and characterize g-tubulin variants. The project is expected to unravel new mechanisms of microtubule regulation during mast cell activation.
Keywords
mast cellssignal transductionmicrotubule nucleationGIT proteinsgamma-tubulin
Public support
Provider
Czech Science Foundation
Programme
Standard projects
Call for proposals
Standardní projekty 22 (SGA0201800001)
Main participants
Ústav molekulární genetiky AV ČR, v. v. i.
Contest type
VS - Public tender
Contract ID
18-27197S
Alternative language
Project name in Czech
Nukleace mikrotubulů aktivovaných žírných buněk: regulační úloha fosforylovaných GIT proteinů
Annotation in Czech
Žírné buňky hrají klíčovou roli při alergiích, v přirozené i adaptivní imunitě. Aktivace žírných buněk antigenem vede ke změnám v koncentraci vápenatých iontů, reorganizaci mikrotubulů (MT) a degranulaci. Dříve jsem ukázali, že se při aktivaci zvyšuje nukleace MT regulovaná vápníkem, a že fosforylovaný signální protein GIT tvoří komplexy s g-tubulinovými variantami a reguluje nukleaci MT z centrozómu. Odpovídající signální dráha je však neznámá. Naše nálezy z poslední doby ukazují, že kinázy patřící do rodin PAK a cPKC kináz mohou fosforylovat GIT. Cílem tohoto projektu je ověřit naši hypotézu, že fosforylace GIT1/2 proteinů těmito kinázami je důležitá pro modulaci nukleace MT. Určíme izoformy kináz, které se účastní regulace nukleace MT a transportu granul podél MT i jejich vnitrobuněčnou lokalizaci. Budou identifikována místa fosforylace na GIT proteinech a jejich význam pro nukleaci MT. Dále budou charakterizovány varianty g-tubulinu. Tato studia by měla vést k odhalení nových mechanizmů regulace mikrotubulů při aktivaci žírných buněk.
Scientific branches
Solution timeline
Realization period - beginning
Jan 1, 2018
Realization period - end
Dec 31, 2020
Project status
—
Latest support payment
Apr 24, 2020
Data delivery to CEP
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data delivery code
CEP21-GA0-GA-R/15:1
Data delivery date
Feb 24, 2021
Finance
Total approved costs
6,998 thou. CZK
Public financial support
6,140 thou. CZK
Other public sources
858 thou. CZK
Non public and foreign sources
0 thou. CZK
Basic information
Recognised costs
6 998 CZK thou.
Public support
6 140 CZK thou.
87%
Provider
Czech Science Foundation
OECD FORD
Cell biology
Solution period
01. 01. 2018 - 31. 12. 2020