Antimicrobial susceptibility testing of temperature-stabilized endolysins
The result's identifiers
Result code in IS VaVaI
<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00027162%3A_____%2F22%3AN0000261" target="_blank" >RIV/00027162:_____/22:N0000261 - isvavai.cz</a>
Result on the web
—
DOI - Digital Object Identifier
—
Alternative languages
Result language
čeština
Original language name
Testování antimikrobiální citlivosti teplotně stabilizovaných endolysinů
Original language description
Endolysiny jsou peptidoglykanové hydrolázy, které hrají důležitou roli při replikačním cyklu bakteriofágů. Endolysiny vykazují silnou lytickou aktivitu zejména vůči grampozitivním bakteriím. Vývoj teplotně stabilizovaných endolysinů a jejich testování antimikrobiální citlivosti. Gen pro endolysin T1 optimalizovaný pro heterologní expresi v E. coli byl vložen do expresního vektoru pUbEx. Pomocí techniky seamless cloning byl gen upraven na celkem pěti místech. Zvýšení termostability bylo ověřeno pomocí thermal shift assay. Antimikrobiální aktivita rekombinantních enzymů byla testována pomocí měření růstových křivek po dobu 24 hodin na meticilin rezistentních kmenech Staphylococcus aureus (ST 22 a ST30). Mutace RL, GP, a SI vedly ke zvýšení antimikrobiálního působení ve srovnání s původní variantou T1. U kmenu ST 22 byla koncentrace dostačující ke snížení počátečního množství mikroorganismů 3,13 μg/mL (původní varianta T1 6,25 μg/mL). U kmenu ST 30 se potřebná koncentrace enzymu snížila z 12,5 (T1) na 6,25 μg/mL. Antimikrobální efekt těchto nových rekombinantních endolysinů se dále prodloužil až o čtyři hodiny v porovnání s původní variantou T1. Další zavedené kombinace těchto mutací již zřejmě destabilizovaly strukturu endolysinu natolik, že antimikrobiální efekt byl nižší, než v případě původní varianty T1.
Czech name
Testování antimikrobiální citlivosti teplotně stabilizovaných endolysinů
Czech description
—
Classification
Type
O - Miscellaneous
CEP classification
—
OECD FORD branch
30303 - Infectious Diseases
Result continuities
Project
<a href="/en/project/NV19-05-00214" target="_blank" >NV19-05-00214: Study of therapeutic application of antibacterial wound dressing for skin and soft tissue infections in epidemiologically relevant strains of S. aureus - methicillin resistant.</a><br>
Continuities
P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)
Others
Publication year
2022
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů