Sensitive Detection and Separation of Fluorescent Derivatives using Capillary Electrophoresis with Laser-Induced Fluorescence Detection with 532 nm Nd:YAG Laser

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00216224%3A14310%2F06%3A00015565" target="_blank" >RIV/00216224:14310/06:00015565 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

angličtina

Original language name

Sensitive Detection and Separation of Fluorescent Derivatives using Capillary Electrophoresis with Laser-Induced Fluorescence Detection with 532 nm Nd:YAG Laser

Original language description

Capillary Electrophoresis with Laser Induced Fluorescence detection (CELIF) is a powerful tool for separation and sensitive determination of fluorescent compounds. Biologically active compounds, such as amino acids, peptides and proteins may exhibit native fluorescence, which is however often low and/or an expensive laser is required for excitation in UV. Therefore, labeling of the analytes with a fluorescent dye is usually necessary. In this work, home-built CELIF instrument was developed and tuned upusing rhodamine-based dyes with diode pumped frequency-doubled continuous wave Nd:YAG excitation laser with feedback power regulation (532 nm). First, the suitability and performance of this type of laser for LIF detection in a separation method was evaluated. Detection limit of 2E-13 M was achieved with rhodamine B, which is comparable to previously described CELIF with Ar+ laser. An exemplary separation of rhodamine dyes is given. Rhodamine based derivatizing agent was chosen for label

Czech name

Citlivá detekce a separace fluoreskujících derivátů pomocí kapilární elektroforézy s laserem indukovanou fluorescenční detekcí s 532 nm laserem Nd: YAG

Czech description

Metoda kapilární elektroforézy s laserem indukovanou fluorescenční detekcí je silným nástrojem pro separaci a citlivou detekci fluoreskujících látek. Mnohé biologicky aktivní látky, jako jsou například peptidy a proteiny mohou přirozeně fluoreskovat, ovšem nativní fluorescence je často nedostatečná a/nebo je nezbytné využít nákladný laser pro excitaci v UV oblasti záření. Výhodné řešení je potom derivatizovat látky pomocí fluoreskujících činidel exctitovatelných běžnými typy laserů a s vysokým kvantovýmvýtěžkem. V této práci byl laboratorně sestaven a s využitím rhodaminových barviv odladěn prototyp přístroje pro CELIF s diodově pumpovaným Nd:YAG excitačním laserem se stabilizací zpětnou vazbou a násobičem frekvence 2x (532 nm). Rozsah použití a účinnost tohoto laseru pro CELIF byly vyhodnoceny a otestovány mezi prvními. Detekční limit 2E-13 mol/l byl dosažen pro Rhodamin B, což je ve shodě s výsledky pro běžně používaný Ar-ion laser. Experimenty zahrnují příkladovou separaci a stanov

Type

J_x - Unclassified - Peer-reviewed scientific article (Jimp, Jsc and Jost)

CEP classification

CB - Analytical chemistry, separation

OECD FORD branch

—

Project

<a href="/en/project/GA203%2F03%2F0515" target="_blank" >GA203/03/0515: Integrated genome and proteome analysis of therapeutically important bacteriophages by combination of electrophoresis and mass spectrometry</a><br>

Continuities

Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)

Publication year

2006

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Name of the periodical

Journal of Luminescence

ISSN

0022-2313

e-ISSN

—

Volume of the periodical

118

Issue of the periodical within the volume

2

Country of publishing house

NL - THE KINGDOM OF THE NETHERLANDS

Number of pages

10

Pages from-to

283-292

UT code for WoS article

—

EID of the result in the Scopus database

—