Determination of reduced and oxidized glutathione in biological samples using liquid chromatography with fluorimetric detection

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F00216275%3A25310%2F07%3A00006436" target="_blank" >RIV/00216275:25310/07:00006436 - isvavai.cz</a>

Alternative codes found

RIV/00216208:11150/07:00003714

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

angličtina

Original language name

Determination of reduced and oxidized glutathione in biological samples using liquid chromatography with fluorimetric detection

Original language description

A HPLC method for determination of both reduced (GSH) and oxidized (GSSG) glutathione in plasma, whole blood and rat hepatocytes has been developed and evaluated. Reduced glutathione reacts with orthophthaldehyde (OPA) to form a stable, highly fluorescent tricyclic derivate at pH 8, while GSSG reacts with OPA at pH 12. At measurement of GSSG, GSH was complexed to N-ethylmaleimide. For the separation, reverse phase column Discovery C18, 150 mm x 4 mm, 5 um, was used. The mixture of methanol and 25 mM sodium hydrogenphosphate (15:85, v/v), pH 6.0, was used as mobile phase. The analytical performance of this method is satisfactory for both GSH and GSSG. The intra-assay coefficients of variation were 1.8 and 2.1% for whole blood, 2.0 and 1.9% for rat hepatocytes, 4.3 and 5.2% for plasma. The inter-assay coefficients of variation were 5.8 and 6.2% for whole blood, 6.6 and 7.1% for rat hepatocytes, 6.9 and 7.8% for plasma. The recoveries were as follows: 98.2% (CV 3.5%) and 101.5% (CV 4.2%)

Czech name

Stanovení redukovaného a oxidovaného glutathionu v biologických vzorcích pomocí kapalinové chromatografie s fluorescenční detekcí

Czech description

Byla zavedena metoda pro stanovení oxidovaného (GSH) a redukovaného (GSSG) glutathionu v plazmě, plné krvi a hepatocytech potkanů. Redukovaný glutathion reaguje při pH kolem 8 s orthoftalaldehydem (OPA) za vzniku vysoce fluoreskujícího tricyklického derivátu, zatímco GSSG reaguje s OPA při pH 12. Při stanovení GSSG, musí být GSH navázán do komplexu s N-ethylmaleimidem. Pro separaci jsme zvolili jako stacionární fázi chromatografickou kolonu Discovery C18, 150 mm x 4 mm, 5 um, mobilní fází byla směs methanolu a 25 mmol/l hydrogenfosforečnanu sodného (15:85, v/v), pH 6,0. Analytické parametry této metody jsou vyhovující jak pro GSH, tak také pro GSSG. Přesnost v sérii, vyjádřena variačním koeficientem, byla pro plnou krev 1,8% a 2,1%, pro potkaní hepatocyty 2,0 a 1,9% a pro plazmu 4,3 a 5,2%. Přesnost mezi sériemi, vyjádřená variačním koeficientem, byla pro plnou krev 5,8 a 6,2%, pro potkaní hepatocyty 6,6 a 7,1% a pro plazmu 6,9 a 7,8%. Výtěžnosti metody byly následující: 98,2% (CV 3,5%

Type

J_x - Unclassified - Peer-reviewed scientific article (Jimp, Jsc and Jost)

CEP classification

CE - Biochemistry

OECD FORD branch

—

Project

—

Continuities

Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)

Publication year

2007

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Name of the periodical

Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis

ISSN

0731-7085

e-ISSN

—

Volume of the periodical

43

Issue of the periodical within the volume

4

Country of publishing house

GB - UNITED KINGDOM

Number of pages

6

Pages from-to

1382-1387

UT code for WoS article

—

EID of the result in the Scopus database

—