Proven technology for the production of phage banks

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F25687191%3A_____%2F23%3AN0000001" target="_blank" >RIV/25687191:_____/23:N0000001 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Ověřená technologie výroby fágových bank

Original language description

Ověřená technologie výroby „fágových bank“ se zabývá výrobou fágových bank, neboli zásobních konzerv k produkci fágových lyzátů. Byla vypracována řízená dokumentace pro přípravu bank k výrobě 4 bakteriofágů účinných proti druhu Acinetobacter baumannii a 8 bakteriofágů účinných proti druhu Klebsiella pneumoniae. U fágových bank byl potvrzen požadovaný titr fágů, byla prokázána sterilita fágových bank a byla potvrzena identita bakteriofágů.

Czech name

Ověřená technologie výroby fágových bank

Czech description

—

Type

Z_tech - Verified technology

CEP classification

—

OECD FORD branch

10606 - Microbiology

Project

<a href="/en/project/FV40027" target="_blank" >FV40027: Research of bacteriophages that are therapeutically effective against resistant bacterial strains occurring in healthcare facilities.</a><br>

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)

Publication year

2023

Confidentiality

C - Předmět řešení projektu podléhá obchodnímu tajemství (§ 504 Občanského zákoníku), ale název projektu, cíle projektu a u ukončeného nebo zastaveného projektu zhodnocení výsledku řešení projektu (údaje P03, P04, P15, P19, P29, PN8) dodané do CEP, jsou upraveny tak, aby byly zveřejnitelné.

Internal product ID

MR-022-0822, MR-023-0822

Numerical identification

—

Technical parameters

Technologie výroby bakteriofágových bank pro výrobu fágů účinných proti bakteriím Klebsiella pneumoniae a Acinetobacter baumannii byla ověřena dle řízené dokumentace, konkrétně dokumentů č. MR-022-0822 a MR-023-0822 . V následujícím textu jsou uvedeny jednotlivé body výrobních procesů. 1) Charakteristika produktů: Anti-klebsiellové (KP4, KP8, KP9, KP10, KP14, KP23, KP33, KP35) a anti-acinetobacterové (AB2, AB3, AB4, AB5) kmeny bakteriofágů byly izolovány z materiálu dodaného Fakultní nemocnicí Ostrava. Fágové banky dělíme na „master“ a pracovní. Pracovní banky se vyrábí z „master“ fágových bank. Pracovní banky se používají pro výrobu léčivých látek – fágových lyzátů. Kromě samotných bakteriofágů obsahují banky také kultivační médium a glycerol. Titr fágů dosahuje hodnot 1×104 PFU/mL v případě “master” bank a 1×107 PFU/mL v případě pracovních bank. Fágové banky jsou uchovávány při teplotě -80 ± 20 °C. Rozmražené banky mají žlutou až světle hnědou barvu a roztok je zakalený. Jednu šarži vyrobených bank tvoří 30-40 kryovialek s 1 ml fágové suspenze. Média, roztoky, agary produkované dle předpisu PO-003 společnosti FAGOFARMA 2) Popis jednotlivých produkčních kroků - Oživení bakteriální kultury – vybrané propagační kmeny Klebsiella pneumoniae a Acinetobacter baumannii – rozmražení, inokulace, kultivace. Následuje kontrola čistoty pomocí kultivace a mikroskopická kontrola. - Inokulace "overnight" kultury – odebrání, inokulace a kultivace bakteriální kultury. Následuje kontrola čistoty pomocí kultivace a mikroskopická kontrola. - Kultivace 5 ml fágového lyzátu – nejprve je do bujónu přidána „overnight“ kultura, která je kultivována v třepacím inkubátoru. Po dosažení požadované optické denzity je přidána suspenze s bakteriofágem a roztok s hořečnatými a vápenatými ionty. Suspenze je následně kultivována v třepacím inkubátoru při požadované teplotě po dobu 90±30 min. Následuje kontrola čistoty pomocí kultivace a mikroskopická kontrola. - Inokulace "overnight" kultury – odebrání, inokulace a kultivace bakteriální kultury. - Kultivace 2 × 20 ml fágového lyzátu – nejprve je do bujónu přidána „overnight“ kultura, která je kultivována v třepacím inkubátoru. Po dosažení požadované optické denzity je přidána suspenze s bakteriofágem (z 5ml lyzátu) a roztok s hořečnatými a vápenatými ionty. Suspenze je následně kultivována v třepacím inkubátoru při požadované teplotě po dobu 90±30 min. Následuje kontrola čistoty pomocí kultivace a mikroskopická kontrola. - Smíchání fágové suspenze s glycerolem a rozplnění suspenze do kryovialek. V této fázi jsou odebrány vzorky pro kontrolu kvality. Následuje uložení bank do -80 ± 20 °C. 4) Kontrola kvality Mezi kontrolní metody patří: - Stanovení titru fága u bank (potence) kultivačně metodou dvojvrstvého agaru - Testování sterility bank, nesmí dojít k nárůstu bakteriálních kolonií - Identifikace bakteriofágů metodou PCR - Průběžně jsou monitorovány čisté prostory, aby se zamezilo kontaminaci

Economical parameters

Základem pro výrobní dokumentaci fágového koktejlu je ověřená technologie výroby fágových bank, která je výsledkem projektu FV40027. Bakteriofágy charakterizované v průběhu řešení projektu mohou být využity také pro vývoj jiných fágových produktů. Během následujících 4 let očekáváme ekonomický profit v řádu statisíců ročně, během této doby bude probíhat preklinické a klinické hodnocení fágového koktejlu a také na případné registraci fágového koktejlu jako léčivého přípravku. Pokud bychom predikovali převzetí trhu s antibiotiky v ČR ve výši 10 % po úspěšné registraci léčivého přípravku na bázi fágů (5. rok po ukončení projektu), pak vychází ekonomický přínos z projektu 12,5 mil. Kč v roce 2027, což považujeme za reálný cíl.

Application category by cost

—

Owner IČO

02132559

Owner name

FAGOFARMA, s.r.o.

Owner country

CZ - CZECH REPUBLIC

Usage type

V - Výsledek je využíván vlastníkem

Licence fee requirement

—

Web page

—