Assay of tyrosine hydroxylase based on high-performance

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F61388971%3A_____%2F07%3A00092260" target="_blank" >RIV/61388971:_____/07:00092260 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

angličtina

Original language name

Assay of tyrosine hydroxylase based on high-performance

Original language description

An assay of L-tyrosine (Tyr) hydroxylating activity operating in lincomycin biosynthesis is described. The assay development consisted of HPLC procedure development, assessing the effect of reaction mixture components on non-enzymatic. Dopa and Tyr oxidation, and sample stability evaluation. The HPLC procedure with isocratic elution and fluorescence detection was developed and validated. The method showed a wide linear range of Dopa determination of 0.125?25 mmol/L with lower limit of quantification (LLOQ) of 0.125 mmol/L, RSD of 7.2 percent and accuracy of 101.7 percent. The studied linear range of Tyr was 15.625 mmol/L to 500 mmol/L with LLOQ of 15.625 mmol/L, RSD of 1.1percent, and accuracy of 98.1percent. Recoveries for Dopa and Tyr were 100.66 percent RSD 61472;0.89 percent and 94.76 percent RSD 61472;0.94 percent, respectively

Czech name

Metoda stanovení tyrosin-hydroxylázy založená na HPLC separaci a stanovení L-dopy a L-tyrosinu

Czech description

Prezentovaný článek popisuje stanovení aktivity tyroxin-hydroxylázy,která je jedním z enzymů v biosyntetické dráze linkomycinu. Metoda obsahuje vývoj HPLC metody, s isokratickou elucí a a fluorescenční detekcí. Při validaci této metody byl určen lineárnírozsah pro DOPU 0.125?25 mmol/L s nejnižším limitem detekce LLOQ 0.125 mmol/L, RSD 7.2 percent a přesností 101.7 percent mmol/L a lineární rozsah pro tyroxin 15.625 mmol/L až 500 mmol/L s LLOQ 15.625 mmol/L, RSD 1.1 percent, a přesností 98.1 percent. Byla stanovena výtěžnost pro Dopa 100.66 percent s RSD 61472;0.89 percent a pro Tyr 94.76 percent s RSD 61472;0.94 percent. Byla stanovena přesnost a správnost metody v testu inter- and intra-day assay, která nepřekročila 10 procent. Dále byla určena stabilita vzorků reakční směsi při pokojové a 8722;20 stupňů C teplotě. Pomocí této metody bylo optimalizováno složení směsi enzymatické reakce a dále byly zjištěny podmínky pro zabránění vzdušné (neenzymatické) oxidace

Type

J_x - Unclassified - Peer-reviewed scientific article (Jimp, Jsc and Jost)

CEP classification

EE - Microbiology, virology

OECD FORD branch

—

Project

Result was created during the realization of more than one project. More information in the Projects tab.

Continuities

Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)

Publication year

2007

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Name of the periodical

Biomedical Chromatography

ISSN

0269-3879

e-ISSN

—

Volume of the periodical

21

Issue of the periodical within the volume

-

Country of publishing house

GB - UNITED KINGDOM

Number of pages

7

Pages from-to

1252-1258

UT code for WoS article

—

EID of the result in the Scopus database

—