Protein C activity in dogs with gastric dilatation and volvulus

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F62157124%3A16170%2F20%3A43878462" target="_blank" >RIV/62157124:16170/20:43878462 - isvavai.cz</a>

Result on the web

<a href="https://www.vfu.cz/files/upload/sekretariat-prorektra-pro-vzdelavani/Sbornik_IGA_2020.pdf" target="_blank" >https://www.vfu.cz/files/upload/sekretariat-prorektra-pro-vzdelavani/Sbornik_IGA_2020.pdf</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Stanovení aktivity proteinu C u psů s dilatací a torzí žaludku

Original language description

Syndrom dilatace a volvulu žaludku (gastric dilatation and volvulus, GDV) je onemocnění, které postihuje především psy velkých a obřích plemen. Příčiny vzniku GDV se doposud nepodařilo plně objasnit. Při již nastalém onemocnění GDV jsou pouze dvě možnosti řešení - chirurgický zákrok nebo eutanázie pacienta. Vzhledem k akutnosti a závažnosti stavu pacientů s GDV a radikálnosti rozhodnutí o terapii je každý prognostický údaj přínosem. Protein C (PC), jeden z účastníků koagulační kaskády, je prekurzor vitamin-K-dependentní serinové proteázy aktivovaného PC, který má v organismu antitrombotický, profibrinolytický a protizánětlivý účinek.1 U lidí je PC považován za negativní protein akutní fáze2 a za negativní prognostický faktor u pacientů se sepsí.3 Také ve veterinární medicíně bylo prokázáno snížení koncentrace PC u pacientů s diseminovanou intravaskulární koagulopatií (DIC).4 Stejně jako u lidí je i u psů v sepsi nízká aktivita PC považována za negativní prognostický faktor.5 Jelikož je u pacientů s GDV vysoké riziko rozvoje DIC a septického stavu, mohlo by stanovení aktivity PC u těchto pacientů představovat cenný prognostický marker. Cílem této práce bylo zhodnotit roli PC jako prognostického markeru u pacientů s GDV a najít vztah mezi sníženou aktivitou PC a mortalitou pacientů s GDV, délkou trvání GDV, stupněm torze žaludku, výskytem nekrózy žaludku, nutností provedení splenektomie a vznikem DIC. Materiál a metodika Do studie byli zahrnuti pacienti Kliniky chorob psů a koček, Fakulty veterinárního lékařství, Veterinární a farmaceutické univerzity Brno s GDV, u nichž bylo provedeno chirurgické řešení stavu. Byly zaznamenány následující údaje: délka trvání GDV před předvedením na kliniku, stupeň torze žaludku, výskyt nekrózy žaludeční stěny, provedení splenektomie a mortalita. Odběry krve u sledovaných pacientů probíhaly v rámci rutinního předoperačního a pooperačního vyšetření, a to v časech: T0 = do půl hodiny před operací, T1 = 1. den po operaci, T2 = 2. den po operaci. Byly hodnoceny následující parametry: funkční aktivita proteinu C (PC), protrombinový čas (PT), aktivovaný parciální tromboplastinový čas (APTT), trombinový čas (TT), hladina fibrinogenu (FIB), D-dimery (DD) a počet trombocytů. Ve stanovených časech byl prováděn odběr krve do zkumavek s citrátem a EDTA. Vzorky s EDTA krví byly určené pro stanovení množství trombocytů buďto do 1 hodiny po odběru nebo po skladování při 4°C, nejpozději do 12 hodin od odběru. Vzorky s citrátovou krví byly do 1 hodiny po odběru odstředěny (5100 otáček po dobu 15 minut) a plasma byla použita pro stanovení PC, PT, APTT, TT, FIB a DD. Citrátová plasma ke stanovení PC byla zamražena při -80°C až do jejího stanovení, s maximální dobou skladování 6 měsíců. Stanovení PT, APTT, TT, FIB a DD z citrátové plasmy probíhalo buďto do 1 hodiny od odběru, a nebo po zmražení vzorku při -20°C/-80°C, nejpozději do 3 dnů od odběru. Pacienti byli hodnoceni jako pacienti s DIC v případě, že se u nich vyskytly minimálně 3 z následujících odchylek: trombocytopenie, prodloužený PT, prodloužený APTT, snížená koncentrace fibrinogenu, zvýšená koncentraci D-dimerů. Bylo provedeno statistické zhodnocení nashromážděných dat, hladina statistické významnosti byla 5 % (p?0,05). Výsledky Do studie bylo zařazeno celkem 26 pacientů, z toho 14 fen a 12 psů. Z 16 různých plemen byli nejčastěji zastoupeni německý ovčák (23,08 %) a velký švýcarský salašnický pes (11,54 %). Průměrná hmotnost pacientů byla 41,68 kg (SD 9,85) a průměrný věk 8,21 let (SD 2,52). Během sledování uhynulo 5 z 26 pacientů (19,23 %). Dva pacienti uhynuli v průběhu chirurgického zákroku, další 3 pacienti uhynuli během pooperační hospitalizace. Aktivitu proteinu C ve sledovaných časech znázorňuje Graf 1. Nebyl prokázán vztah mezi mortalitou pacientů a plemenem, pohlavím nebo věkem. Vliv výskytu nekrózy žaludku na mortalitu pacienta nebyl statisticky prokázán, přesto při analýze logistickou regresí bylo zjištěno, že výskyt nekrózy žaludku u pacientů s GDV 11x zvyšuje riziko úhynu (Graf 2). Vztah mezi sníženou aktivitou PC a mortalitou pacientů s GDV nebyl prokázán v čase T0, T1 ani T2, přesto všichni pacienti, kteří uhynuli během hospitalizace, patřili do skupiny pacientů se sníženou aktivitou PC v čase T1 (Graf 3). Nebyl prokázán vztah mezi sníženou aktivitou PC a délkou trvání GDV, stupněm torze žaludku, nekrózou žaludku a splenektomií. Dále nebyl prokázán vztah mezi sníženou aktivitou PC před operací a vznikem DIC čase T0, T1 a T2. Byla prokázána statistická významnost mezi výskytem DIC v čase T2 a mortalitou pacientů. Závěr Prognostické faktory u pacientů s GDV jsou předmětem četných studií, jako příklad můžeme uvést hodnocení C-reaktivního proteinu (CRP), high mobility group box 1 (HMGB1), laktátu, parametrů acidobazické rovnováhy, nebo myoglobinu.6-11 Nalezení spolehlivého prognostického faktoru, který by usnadnil rozhodování ohledně přínosu chirurgické terapie u konkrétního pacienta se dosud nepodařilo. Prozatím nejpřínosnějším parametrem stanovovaným u pacientů s GDV před operací je koncentrace laktátu v krvi, nicméně ani tento parametr nemá 100 % prediktivní hodnotu.7,8,10 Ani nám se v naší studii nepodařilo prokázat roli aktivity PC jako prognostického faktoru mortality u těchto pacientů, stejně tak se nepodařilo prokázat vztah mezi aktivitou PC a závažností GDV (délka trvání, stupeň torze žaludku, nekróza žaludku, splenektomie). Přesto se ukázalo, že všichni pacienti, kteří uhynuli během hospitalizace, patřili do skupiny pacientů se sníženou aktivitou PC v čase T1 (první den po operaci). Podobné výsledky zaznamenali také Verschoof a kol. (2015). Přestože se nezdá pravděpodobné, že by PC představoval vhodný předoperační prognostický marker u pacientů s GDV, dosavadní výsledky poukazují na to, že jeho snížená aktivita má vliv na pooperační přežívání pacientů. Do budoucna by proto bylo vhodné zhodnotit tento parametr na větším souboru pacientů.

Czech name

Stanovení aktivity proteinu C u psů s dilatací a torzí žaludku

Czech description

Syndrom dilatace a volvulu žaludku (gastric dilatation and volvulus, GDV) je onemocnění, které postihuje především psy velkých a obřích plemen. Příčiny vzniku GDV se doposud nepodařilo plně objasnit. Při již nastalém onemocnění GDV jsou pouze dvě možnosti řešení - chirurgický zákrok nebo eutanázie pacienta. Vzhledem k akutnosti a závažnosti stavu pacientů s GDV a radikálnosti rozhodnutí o terapii je každý prognostický údaj přínosem. Protein C (PC), jeden z účastníků koagulační kaskády, je prekurzor vitamin-K-dependentní serinové proteázy aktivovaného PC, který má v organismu antitrombotický, profibrinolytický a protizánětlivý účinek.1 U lidí je PC považován za negativní protein akutní fáze2 a za negativní prognostický faktor u pacientů se sepsí.3 Také ve veterinární medicíně bylo prokázáno snížení koncentrace PC u pacientů s diseminovanou intravaskulární koagulopatií (DIC).4 Stejně jako u lidí je i u psů v sepsi nízká aktivita PC považována za negativní prognostický faktor.5 Jelikož je u pacientů s GDV vysoké riziko rozvoje DIC a septického stavu, mohlo by stanovení aktivity PC u těchto pacientů představovat cenný prognostický marker. Cílem této práce bylo zhodnotit roli PC jako prognostického markeru u pacientů s GDV a najít vztah mezi sníženou aktivitou PC a mortalitou pacientů s GDV, délkou trvání GDV, stupněm torze žaludku, výskytem nekrózy žaludku, nutností provedení splenektomie a vznikem DIC. Materiál a metodika Do studie byli zahrnuti pacienti Kliniky chorob psů a koček, Fakulty veterinárního lékařství, Veterinární a farmaceutické univerzity Brno s GDV, u nichž bylo provedeno chirurgické řešení stavu. Byly zaznamenány následující údaje: délka trvání GDV před předvedením na kliniku, stupeň torze žaludku, výskyt nekrózy žaludeční stěny, provedení splenektomie a mortalita. Odběry krve u sledovaných pacientů probíhaly v rámci rutinního předoperačního a pooperačního vyšetření, a to v časech: T0 = do půl hodiny před operací, T1 = 1. den po operaci, T2 = 2. den po operaci. Byly hodnoceny následující parametry: funkční aktivita proteinu C (PC), protrombinový čas (PT), aktivovaný parciální tromboplastinový čas (APTT), trombinový čas (TT), hladina fibrinogenu (FIB), D-dimery (DD) a počet trombocytů. Ve stanovených časech byl prováděn odběr krve do zkumavek s citrátem a EDTA. Vzorky s EDTA krví byly určené pro stanovení množství trombocytů buďto do 1 hodiny po odběru nebo po skladování při 4°C, nejpozději do 12 hodin od odběru. Vzorky s citrátovou krví byly do 1 hodiny po odběru odstředěny (5100 otáček po dobu 15 minut) a plasma byla použita pro stanovení PC, PT, APTT, TT, FIB a DD. Citrátová plasma ke stanovení PC byla zamražena při -80°C až do jejího stanovení, s maximální dobou skladování 6 měsíců. Stanovení PT, APTT, TT, FIB a DD z citrátové plasmy probíhalo buďto do 1 hodiny od odběru, a nebo po zmražení vzorku při -20°C/-80°C, nejpozději do 3 dnů od odběru. Pacienti byli hodnoceni jako pacienti s DIC v případě, že se u nich vyskytly minimálně 3 z následujících odchylek: trombocytopenie, prodloužený PT, prodloužený APTT, snížená koncentrace fibrinogenu, zvýšená koncentraci D-dimerů. Bylo provedeno statistické zhodnocení nashromážděných dat, hladina statistické významnosti byla 5 % (p?0,05). Výsledky Do studie bylo zařazeno celkem 26 pacientů, z toho 14 fen a 12 psů. Z 16 různých plemen byli nejčastěji zastoupeni německý ovčák (23,08 %) a velký švýcarský salašnický pes (11,54 %). Průměrná hmotnost pacientů byla 41,68 kg (SD 9,85) a průměrný věk 8,21 let (SD 2,52). Během sledování uhynulo 5 z 26 pacientů (19,23 %). Dva pacienti uhynuli v průběhu chirurgického zákroku, další 3 pacienti uhynuli během pooperační hospitalizace. Aktivitu proteinu C ve sledovaných časech znázorňuje Graf 1. Nebyl prokázán vztah mezi mortalitou pacientů a plemenem, pohlavím nebo věkem. Vliv výskytu nekrózy žaludku na mortalitu pacienta nebyl statisticky prokázán, přesto při analýze logistickou regresí bylo zjištěno, že výskyt nekrózy žaludku u pacientů s GDV 11x zvyšuje riziko úhynu (Graf 2). Vztah mezi sníženou aktivitou PC a mortalitou pacientů s GDV nebyl prokázán v čase T0, T1 ani T2, přesto všichni pacienti, kteří uhynuli během hospitalizace, patřili do skupiny pacientů se sníženou aktivitou PC v čase T1 (Graf 3). Nebyl prokázán vztah mezi sníženou aktivitou PC a délkou trvání GDV, stupněm torze žaludku, nekrózou žaludku a splenektomií. Dále nebyl prokázán vztah mezi sníženou aktivitou PC před operací a vznikem DIC čase T0, T1 a T2. Byla prokázána statistická významnost mezi výskytem DIC v čase T2 a mortalitou pacientů. Závěr Prognostické faktory u pacientů s GDV jsou předmětem četných studií, jako příklad můžeme uvést hodnocení C-reaktivního proteinu (CRP), high mobility group box 1 (HMGB1), laktátu, parametrů acidobazické rovnováhy, nebo myoglobinu.6-11 Nalezení spolehlivého prognostického faktoru, který by usnadnil rozhodování ohledně přínosu chirurgické terapie u konkrétního pacienta se dosud nepodařilo. Prozatím nejpřínosnějším parametrem stanovovaným u pacientů s GDV před operací je koncentrace laktátu v krvi, nicméně ani tento parametr nemá 100 % prediktivní hodnotu.7,8,10 Ani nám se v naší studii nepodařilo prokázat roli aktivity PC jako prognostického faktoru mortality u těchto pacientů, stejně tak se nepodařilo prokázat vztah mezi aktivitou PC a závažností GDV (délka trvání, stupeň torze žaludku, nekróza žaludku, splenektomie). Přesto se ukázalo, že všichni pacienti, kteří uhynuli během hospitalizace, patřili do skupiny pacientů se sníženou aktivitou PC v čase T1 (první den po operaci). Podobné výsledky zaznamenali také Verschoof a kol. (2015). Přestože se nezdá pravděpodobné, že by PC představoval vhodný předoperační prognostický marker u pacientů s GDV, dosavadní výsledky poukazují na to, že jeho snížená aktivita má vliv na pooperační přežívání pacientů. Do budoucna by proto bylo vhodné zhodnotit tento parametr na větším souboru pacientů.

Type

D - Article in proceedings

CEP classification

—

OECD FORD branch

40301 - Veterinary science

Project

—

Continuities

S - Specificky vyzkum na vysokych skolach

Publication year

2020

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Article name in the collection

Sborník příspěvků z výsledků řešení projektů IGA VFU Brno 2020

ISBN

978-80-7305-848-7

ISSN

—

e-ISSN

—

Number of pages

5

Pages from-to

21-25

Publisher name

Veterinární a farmaceutická univerzita Brno

Place of publication

Brno

Event location

Brno

Event date

Dec 10, 2020

Type of event by nationality

CST - Celostátní akce

UT code for WoS article

—