Effect of sperm and glycerol concentration on frozen-thawed epididymal sperm motility parameters

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F62157124%3A16170%2F20%3A43878741" target="_blank" >RIV/62157124:16170/20:43878741 - isvavai.cz</a>

Result on the web

<a href="https://www.vfu.cz/files/upload/sekretariat-prorektra-pro-vzdelavani/Sbornik_IGA_2020.pdf" target="_blank" >https://www.vfu.cz/files/upload/sekretariat-prorektra-pro-vzdelavani/Sbornik_IGA_2020.pdf</a>

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Vliv koncentrace spermií a glycerolu na parametry motility epididymálních spermií po rozmrazení inseminační dávky

Original language description

V současné době je k mrazení ejakulovaných i epididymálních spermií hřebců jako základní kryoprotektivum používaný glycerol. Některé studie ukázaly, že koncentrace glycerolu vyšší jak 2,5 % však spermiím už výrazně škodí a snižují tedy kvalitu inseminačních dávek. Většina těchto studií probíhala při relativně nízké koncentraci spermií 100-200 x 106 v ml, což znamená, že takto připravené inseminační dávky se nutně skládají z více pejet (obvykle 5?10), což je nepraktické z hlediska prostoru při uchovávání i při samotné manipulaci při inseminaci klisny. Z předchozí studie autorů vyplynulo, že koncentrace glycerolu a jeho škodlivost pro spermie je úzce spojena právě s koncentrací spermií použitých při přípravě inseminační dávky, proto by bylo výhodné využívat pro mrazení vyšší koncentraci spermií. Cílem projektu bylo ověřit hypotézu, že motilita epididymálních spermií po rozmrazení je závislá na koncentraci kryoprotektiva glycerolu a koncentraci spermií, která je při mrazení použita. V projektu byly použity epididymální spermie získané retrográdním výplachem ocasu nadvarlete a ductus deferens z nadvarlat hřebců při kastracích na KCHK a v terénních podmínkách. Po výplachu byla orientačně posouzena jejich motilita pomocí světelného mikroskopu a pomocí CASA systému. Vzorky byly následně zcentrifugovány, supernatant odsát a spermie resuspendovány v ředidle tak, aby vzniklo 9 vzorků s různou koncentrací spermií (250, 500 a 1000 x 106 v ml) a různou koncentrací glycerolu (2 %, 4 % a 6 %). Jejich motilita byla posouzena pomocí CASA systému. Vzorky byly rozplněny do pejet a zamrazeny běžným postupem KCHK. Nejdříve po 5 dnech byly rozmrazeny a pomocí CASA systému byla posuzována motilita ihned po rozmrazení, a inkubaci ve vodní lázni po 60, 120 a 180 min. V naší studii jsme potvrdili naši hypotézu, a jako nejideálnější se ukázala koncentrace spermií 1000 x 106 v ml a koncentrace glycerolu 4 %.

Czech name

Vliv koncentrace spermií a glycerolu na parametry motility epididymálních spermií po rozmrazení inseminační dávky

Czech description

V současné době je k mrazení ejakulovaných i epididymálních spermií hřebců jako základní kryoprotektivum používaný glycerol. Některé studie ukázaly, že koncentrace glycerolu vyšší jak 2,5 % však spermiím už výrazně škodí a snižují tedy kvalitu inseminačních dávek. Většina těchto studií probíhala při relativně nízké koncentraci spermií 100-200 x 106 v ml, což znamená, že takto připravené inseminační dávky se nutně skládají z více pejet (obvykle 5?10), což je nepraktické z hlediska prostoru při uchovávání i při samotné manipulaci při inseminaci klisny. Z předchozí studie autorů vyplynulo, že koncentrace glycerolu a jeho škodlivost pro spermie je úzce spojena právě s koncentrací spermií použitých při přípravě inseminační dávky, proto by bylo výhodné využívat pro mrazení vyšší koncentraci spermií. Cílem projektu bylo ověřit hypotézu, že motilita epididymálních spermií po rozmrazení je závislá na koncentraci kryoprotektiva glycerolu a koncentraci spermií, která je při mrazení použita. V projektu byly použity epididymální spermie získané retrográdním výplachem ocasu nadvarlete a ductus deferens z nadvarlat hřebců při kastracích na KCHK a v terénních podmínkách. Po výplachu byla orientačně posouzena jejich motilita pomocí světelného mikroskopu a pomocí CASA systému. Vzorky byly následně zcentrifugovány, supernatant odsát a spermie resuspendovány v ředidle tak, aby vzniklo 9 vzorků s různou koncentrací spermií (250, 500 a 1000 x 106 v ml) a různou koncentrací glycerolu (2 %, 4 % a 6 %). Jejich motilita byla posouzena pomocí CASA systému. Vzorky byly rozplněny do pejet a zamrazeny běžným postupem KCHK. Nejdříve po 5 dnech byly rozmrazeny a pomocí CASA systému byla posuzována motilita ihned po rozmrazení, a inkubaci ve vodní lázni po 60, 120 a 180 min. V naší studii jsme potvrdili naši hypotézu, a jako nejideálnější se ukázala koncentrace spermií 1000 x 106 v ml a koncentrace glycerolu 4 %.

Type

D - Article in proceedings

CEP classification

—

OECD FORD branch

40301 - Veterinary science

Project

—

Continuities

S - Specificky vyzkum na vysokych skolach<br>I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Publication year

2020

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Article name in the collection

Sborník příspěvků z výsledků řešení projektů IGA VFU Brno 2020

ISBN

978-80-7305-848-7

ISSN

—

e-ISSN

—

Number of pages

4

Pages from-to

42-45

Publisher name

Veterinární a farmaceutická univerzita Brno

Place of publication

Brno

Event location

Brno

Event date

Dec 10, 2020

Type of event by nationality

CST - Celostátní akce

UT code for WoS article

—