A new automated technique for the reconstitution of hydrophobic proteins into planar bilayer membranes. Studies of human recombinant uncoupling protein 1
The result's identifiers
Result code in IS VaVaI
<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F67985823%3A_____%2F06%3A00041779" target="_blank" >RIV/67985823:_____/06:00041779 - isvavai.cz</a>
Result on the web
—
DOI - Digital Object Identifier
—
Alternative languages
Result language
angličtina
Original language name
A new automated technique for the reconstitution of hydrophobic proteins into planar bilayer membranes. Studies of human recombinant uncoupling protein 1
Original language description
We describe an automated technique for reconstitution of membrane proteins into lipid bilayer membranes. The method allows investigation of single protein channels as well as insertion of multiple copies (~10 /7/) into a single bilayer. Despite a comparatively large membrane area (up to 300 microm diameter) the high stability of the membrane permits the application of transmembrane voltages up to 300 mV. This feature is especially important for studies of inner membrane mitochondrial proteins, since they fact at potentials up to - 200 mV under physiological conditions. We have applied the new technique for the reconstitution and electrophysiological characterisation of human recombinant uncoupling protein 1, hUCP1 that has been overexpressed in E.coliand purified from inclusion bodies. We demonstrate that the hUCP1 activity in the presence of fatty acids is comparable to the activity of UCP1 isolated from brown adipose tissue
Czech name
Nová automatizovaná technika rekonstituce hydrofobních proteinů do planárních lipidních membrán. Studie lidského rekombinantního odpřahujícího proteinu 1
Czech description
Popisujeme novou automatizovanou techniku pro rekonstituci membránových proteinů do planárních lipidních membrán. Metoda umožňuje studovat jednotlivé protonové kanály a rovněž jejich soubor až do ~10(7) kopií. Nehledě na relativně velkou membránu (průměr300 mikrom) je tato stabilní a dovolí napětí až 300 mV. Tato vlastnost je specificky důležitá pro studium proteinů vnitřní mitochodnriální membrány, podléhajících napětí až - 200 mV za fyziologických podmínek. Metodiku jsme aplikovali na rekonstituci aelektrofyziologickou charakterizaci lidského rekombinantního odpřahujícího proteinu 1, hUCP1, exprimovaného v E.coli. Prokázali jsme, že pro jeho aktivitu jsou absolutně esenciální mastné kyseliny
Classification
Type
J<sub>x</sub> - Unclassified - Peer-reviewed scientific article (Jimp, Jsc and Jost)
CEP classification
BO - Biophysics
OECD FORD branch
—
Result continuities
Project
Result was created during the realization of more than one project. More information in the Projects tab.
Continuities
P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)
Others
Publication year
2006
Confidentiality
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Data specific for result type
Name of the periodical
Biochimica Et Biophysica Acta-Bioenergetics
ISSN
0005-2728
e-ISSN
—
Volume of the periodical
1757
Issue of the periodical within the volume
5-6
Country of publishing house
NL - THE KINGDOM OF THE NETHERLANDS
Number of pages
6
Pages from-to
474-479
UT code for WoS article
—
EID of the result in the Scopus database
—