Sensitive electrochemical determination of unlabeled MutS protein and detection of point mutations in DNA

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F68081707%3A_____%2F04%3A00104693" target="_blank" >RIV/68081707:_____/04:00104693 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

angličtina

Original language name

Sensitive electrochemical determination of unlabeled MutS protein and detection of point mutations in DNA

Original language description

MutS protein plays an important role in the DNA repair system in prokaryotic and eukaryotic cells; it recognizes unpaired and mispaired bases in duplex DNA and can be used for detection of point mutations in vitro. We have shown that small amounts of this protein can be detected electrochemically at mercury and carbon electrodes without any labeling. Using constant current stripping analysis (CPSA) and mercury electrodes, tens of attomoles of this protein can be detected. The sensitivity of the determination at carbon electrodes is by more than 3 orders of magnitude lower. Using biotinylated DNA duplexes attached to magnetic beads, single-base mismatches and insertion/deletions were recognized by MutS. Picogram amounts of this protein were detected byCPSA after MutS releasing from the beads.

Czech name

Elektrochemické stanovení neznačeného proteinu MutS a detekce bodových mutací v DNA

Czech description

Protein MutS hraje velice významnou úlohu v reparačním systému DNA u prokaryotických i eukaryotických buněk, kde rozpoznává nepárované nebo špatně párované báze v dvoušroubovici DNA a může být využit pro detekci bodových mutací in vitro. V této experimentální studii jsme ukázali, že malá množství tohoto proteinu je možné elektrochemicky detekovat na rtuťové i uhlíkové elektrodě bez jakéhokoliv značení. S využitím chronopotenciometrické rozpouštěcí analýzy a rtuťové elektrody je možno detekovat desítky attomolů proteinu MutS. Citlivost stanovení na uhlíkové elektrodě je více než o tři řády nižší. S využitím biotinylovaných dvouřetězcových oligonukleotidů přichycených na magnetické nosiče a proteinu MutS bylo možno rozpoznat nesprávně párované báze (případně inserce/dalece bází) v DNA. Po uvolnění z magnetických nosičů jsme detekovali pikogramová množství tohoto proteinu.

Type

J_x - Unclassified - Peer-reviewed scientific article (Jimp, Jsc and Jost)

CEP classification

BO - Biophysics

OECD FORD branch

—

Project

Result was created during the realization of more than one project. More information in the Projects tab.

Continuities

P - Projekt vyzkumu a vyvoje financovany z verejnych zdroju (s odkazem do CEP)<br>Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)

Publication year

2004

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Name of the periodical

Analytical Chemistry

ISSN

0003-2700

e-ISSN

—

Volume of the periodical

76

Issue of the periodical within the volume

19

Country of publishing house

US - UNITED STATES

Number of pages

7

Pages from-to

5930-5936

UT code for WoS article

—

EID of the result in the Scopus database

—