Innovative methodology of freeze-fracturing and cryo-SEM demontrated on Candida parapsilosis biofilm

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F68081731%3A_____%2F19%3A00500461" target="_blank" >RIV/68081731:_____/19:00500461 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

čeština

Original language name

Inovativní metodika mrazového lámání a cryo-SEM demonstrovaná na biofilmu Candidy parapsilosis

Original language description

Předložená studie představuje nové technické řešení umožňující kombinaci mrazového lámání (freeze-fracturing) malých safírových disků s poloměrem 1,4 mm používaných pro vysokotlaké mražení (high pressure freezing, HPF) a zobrazování pomocí kryogenní rastrovací elektronové mikroskopie (cryo-SEM). Práce zahrnuje podrobný popis metodologie a její demonstraci na plně hydratovaných vzorcích kvasinkových biofilmů, kmen Candida parapsilosis, který patří mezi významné mikroorganismy v klinické praxi. Cryo-SEM a HPF jsou považovány za špičkové techniky v elektronové mikroskopii, avšak jejich kombinace není vždy snadno použitelná. Popsané technicko-metodologické řešení umožňuje kombinaci vysokotlakého zmrazování pomocí EM PACT2 (Leica Microsystems) a zobrazování perpendikulárního mrazového lomu pomocí SEM (Jeol), který je vybaven systémem ALTO 2500 (Gatan). Pro uchycení vzorku a jeho následné lámání byl vyvinut speciální držák, jehož použití je demonstrováno na několika experimentech zabývajících se výzkumem ultrastruktury mikrobiálních biofilmů, kde je hlavním cílem vizualizace biofilmu se zaměřením na kvalitu promražení jeho extracelulární polymerní substance (EPS) a detekce oblasti přilnutí mikrobiálních buněk k substrátu/povrchu safírového disku.

Czech name

Inovativní metodika mrazového lámání a cryo-SEM demonstrovaná na biofilmu Candidy parapsilosis

Czech description

Předložená studie představuje nové technické řešení umožňující kombinaci mrazového lámání (freeze-fracturing) malých safírových disků s poloměrem 1,4 mm používaných pro vysokotlaké mražení (high pressure freezing, HPF) a zobrazování pomocí kryogenní rastrovací elektronové mikroskopie (cryo-SEM). Práce zahrnuje podrobný popis metodologie a její demonstraci na plně hydratovaných vzorcích kvasinkových biofilmů, kmen Candida parapsilosis, který patří mezi významné mikroorganismy v klinické praxi. Cryo-SEM a HPF jsou považovány za špičkové techniky v elektronové mikroskopii, avšak jejich kombinace není vždy snadno použitelná. Popsané technicko-metodologické řešení umožňuje kombinaci vysokotlakého zmrazování pomocí EM PACT2 (Leica Microsystems) a zobrazování perpendikulárního mrazového lomu pomocí SEM (Jeol), který je vybaven systémem ALTO 2500 (Gatan). Pro uchycení vzorku a jeho následné lámání byl vyvinut speciální držák, jehož použití je demonstrováno na několika experimentech zabývajících se výzkumem ultrastruktury mikrobiálních biofilmů, kde je hlavním cílem vizualizace biofilmu se zaměřením na kvalitu promražení jeho extracelulární polymerní substance (EPS) a detekce oblasti přilnutí mikrobiálních buněk k substrátu/povrchu safírového disku.

Type

J_ost - Miscellaneous article in a specialist periodical

CEP classification

—

OECD FORD branch

20302 - Applied mechanics

Project

<a href="/en/project/LO1212" target="_blank" >LO1212: ALISI - Centre of advanced diagnostic methods and technologies</a><br>

Continuities

I - Institucionalni podpora na dlouhodoby koncepcni rozvoj vyzkumne organizace

Publication year

2019

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Name of the periodical

Jemná mechanika a optika

ISSN

0447-6441

e-ISSN

—

Volume of the periodical

64

Issue of the periodical within the volume

1

Country of publishing house

CZ - CZECH REPUBLIC

Number of pages

3

Pages from-to

15-17

UT code for WoS article

—

EID of the result in the Scopus database

—