Opposite roles of domains 2+3 of Escherichia coli EF-Tu nd Bacillus stearothermophilus EF-Tu in the regulation of EF-Tu GTPase activity

Result code in IS VaVaI

<a href="https://www.isvavai.cz/riv?ss=detail&h=RIV%2F68378050%3A_____%2F05%3A00025248" target="_blank" >RIV/68378050:_____/05:00025248 - isvavai.cz</a>

Result on the web

—

DOI - Digital Object Identifier

—

Result language

angličtina

Original language name

Opposite roles of domains 2+3 of Escherichia coli EF-Tu nd Bacillus stearothermophilus EF-Tu in the regulation of EF-Tu GTPase activity

Original language description

The effect of noncatalytic domains 2+3 on the intrinsic activity and thermostability of the EF-Tu GTPase center was evaluated in experiments with isolated domains 1 and six chimeric variants of mesophilic Escherichia coli (Ec) and thermophilic Bacillus stearothermophilus (Bst) EF-Tus. The isolated catalytic domains 1 of both EF-Tus displayed similar GTPase activities at their optimal temperatures. However, noncatalytic domains 2+3 of the EF-Tus influenced the GTPase activity of domains 1 differently, depending on the domain origin. Ecdomains 2+3 suppressed the GTPase activity of the Ecdomain 1, whereas those of BstEF-Tu stimulated the Bstdomain 1 GTPase. Domain 1 and domains 2+3 of both EF-Tus positively cooperated to heat-stabilize their GTPase centers to attain optimal activity at a temperature close to the optimal growth temperature of either organism. This can be explained by a stabilization effect of domains 2+3 on a-helical regions of the G-domain as revealed by CD spectroscopy.

Czech name

Opačný vliv domén 2+3 z EF-Tu z Escherichia coli a Bacillus stearothermophilus na regulaci GTPázové aktivity EF-Tu

Czech description

Cílem práce byla charakterizace účinku nekatalytických domén 2+3 na vnitřní GTPázovou aktivitu a termostabilitu GTPázového centra EF-Tu. Porovnány byly aktivity izolované domény 1 a šesti chimerních variant EF-Tu složených z domén mezofilního (Escherichia coli) a termofilního (Bacillus stearothermophilus) proteinu. Izolované katalytické domény 1 z obou EF-Tu měly ve svých teplotních optimech podobnou GTPázovou aktivitu. Nekatalytické domény 2+3 různě ovlivnily GTPázovou aktivitu domén 1. Domény 2+3 z E.coli snižovaly GTPázovou aktivitu domény 1 z E. coli, zatímco domény 2+3 z B. stearothemophilus stimulovaly GTPázu domény 1 z B. stearothermophilus. Dále, doména 1 a domény 2+3 pozitivně kooperovaly při tepelné stabilizaci jejich GTPázových center na úroveň optimální růstové teploty obou organismů. Měření CD spektroskopie v 220 nm ukázalo, že domény 2+3 stabilizují a-helikální oblasti G-domén.

Type

J_x - Unclassified - Peer-reviewed scientific article (Jimp, Jsc and Jost)

CEP classification

EB - Genetics and molecular biology

OECD FORD branch

—

Project

<a href="/en/project/GA303%2F02%2F0689" target="_blank" >GA303/02/0689: Artificial Evolution of Thermostable Elongation Factor Tu</a><br>

Continuities

Z - Vyzkumny zamer (s odkazem do CEZ)

Publication year

2005

Confidentiality

S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů

Name of the periodical

Biochimica Et Biophysica Acta-Proteins and Proteomics

ISSN

1570-9639

e-ISSN

—

Volume of the periodical

1752

Issue of the periodical within the volume

1

Country of publishing house

NL - THE KINGDOM OF THE NETHERLANDS

Number of pages

7

Pages from-to

11-17

UT code for WoS article

—

EID of the result in the Scopus database

—