Změny mobility a funkce receptoru pro opioidy typu δ vyvolané akutní a chronickou deplecí cholesterolu v plazmatických membránách živých buněk

Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
Program
Standardní projekty
Veřejná soutěž
Standardní projekty 21 (SGA0201700001)
Hlavní účastníci
Fyziologický ústav AV ČR, v. v. i.<br>Ústav fyzikální chemie J. Heyrovského AV ČR, v. v. i.
Druh soutěže
VS - Veřejná soutěž
Číslo smlouvy
17-05903S

Název projektu anglicky
Alterations of δ-opioid receptor mobility and function by acute and chronic depletion of plasma membrane cholesterol content of live cells
Anotace anglicky
Detailed analysis of the effect of acute and chronic depletion of cell cholesterol level on δ-opioid receptor mobility and function in plasma membrane of model cell lines. For this aim, HEK293 and NG108-15 cells transiently expressing δ-OR-eCFP and δ-OR-eYFP will be analyzed by advanced techniques of fluorescence microscopy FRAP, RICS, FCS, TIRF and 2PPM. Subsequently, alterations of δ-OR mobility will be correlated with alterations of agonist ligand binding, and function of δ-OR measured by agonist-stimulated [35S]GTPγS binding. These experiments will be performed in HEK293 cells stably expressing FLAG-δ-OR and NG108-15 cells. “Antibody feeding” method will be used to distinguish internalized and cell surface pools of δ-OR. Functional studies of δ-OR will be performed in isolated plasma membranes and detergent-untreated, low-density membrane domains. Project will extend the insight into the toxic side-effects of statin-based therapies and bring new knowledge about correlation between lateral mobility of δ-OR in plasma membrane of live cells and its functional significance.

Kategorie VaV
ZV - Základní výzkum
CEP - hlavní obor
CE - Biochemie
CEP - vedlejší obor
—
CEP - další vedlejší obor
—
OECD FORD - odpovídající obory <br>(dle <a href="http://www.vyzkum.cz/storage/att/E6EF7938F0E854BAE520AC119FB22E8D/Prevodnik_oboru_Frascati.pdf">převodníku</a>)
10608 - Biochemistry and molecular biology<br>10609 - Biochemical research methods

Hodnocení poskytovatelem
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Zhodnocení výsledků projektu
Pomocí řady technik zahrnující i nově vyvinutou metodu FRAP analýzy široce použitelnou v membránové biologii byl popsán vliv deplece cholesterolu a Ca iontů na laterální mobilitu delta-opioidních receptorů. Výsledky projektu a souvisejících studií byly zveřejněny v 8 článcích v časopisech s IF. V průběhu řešení se nevyskytly nedostatky v dodržování pravidel či finanční disciplíně.

Důvěrnost údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Systémové označení dodávky dat
CEP20-GA0-GA-U/02:1
Datum dodání záznamu
23. 7. 2020

Podobné projekty(10)