Mapování povrchových epitopů glykoproteinu gp135 viru Maedi-Visna
Cíle projektu
Cílem projektu je mapování konzervovaných a varibilních epitotypů viru Maedi-Visna. Gen env kódující tento glykoprotein bude nejprve sekvetován a poté exprimován jako několik parciálních rekombinantních proteinů v E. Coli. Každý z těchto proteinů bude použit jako antigen v sérologické reakci a bude zjišťována jeho reaktivita s větším množství ovčích, Madei - Visna pozitivních sér. Reaktivita těchto sér bude nepřímo úměrná stupni variability daného proteinového fragmentu. Tyto fragmenty budou dále použity k imunizaci králíků a získaná antiepitopová séra budou testována v neutralizačním testu na buněčných kulturách. Tímto způsobem budeme schopni přesně lokalizovat neutralizační doménu viru. Stejná antisera použijeme v testech imunodifuze, imunoprecipitace a imunoblotu k částečnému stanovení konformačních epitopů a terciálnní struktury. Mapování epytopů povrchového glykoproteinu Maedi-Visna rozšíří znalosti o této nesmírně významné virové strukturální i funkční komponentě lentivirů. Přínosné bude zejmén
Klíčová slova
Veřejná podpora
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
Program
Standardní projekty
Veřejná soutěž
—
Hlavní účastníci
Veterinární univerzita Brno
Druh soutěže
—
Číslo smlouvy
—
Alternativní jazyk
Název projektu anglicky
Mapping the surface epitopes of the gp135 glycoprotein of the Maedi- Visna virus
Anotace anglicky
The main objective of the present project is to map the envelope glycoprotein gp 135 (SU) of the Maedi-Visna virus in terms of the presence of conserved and variable regions, and possibly it's spatial arrangement. We plan to express gp 135 as several bacterial fusion proteins. Each protein will be used as a coat in ELISA test and will be tested for reactivity with Maedi-Visna positive ovine sera. This reactivity will indicate the degree of variability of a given protein fragment. In order to localise neutralising epitopes, rabbits will be immunised with aforementioned fusion proteins. Resulting immune sera will be tested for neutralising properties in neutralisation tests on tissue culture system. Mapping the epitopes of the envelope glycoprotein of the Maedi-Visna virus will give information on this important viral structural and functional component of lentiviruses. Important will be in particular the determination of the correlation between the computer-prognosed structure of gp 135 based on compa
Vědní obory
Kategorie VaV
—
CEP - hlavní obor
EE - Mikrobiologie, virologie
CEP - vedlejší obor
GJ - Choroby a škůdci zvířat, veterinární medicina
CEP - další vedlejší obor
—
OECD FORD - odpovídající obory
(dle převodníku)10606 - Microbiology
10607 - Virology
40301 - Veterinary science
Hodnocení dokončeného projektu
Hodnocení poskytovatelem
U - Uspěl podle zadání (s publikovanými či patentovanými výsledky atd.)
Zhodnocení výsledků projektu
Řešení projektu se ubíralo dvěma hlavními směry: 1) mapování epitopů proteinu p25 a 2) mapování epitopů proteinu gp 135 v bakteriálních b.E.coli. Práce na projektu byla provázena nedostatky takového charakteru, že řešitelé byli požádáni o doplnění průběž
Termíny řešení
Zahájení řešení
1. 1. 1997
Ukončení řešení
1. 1. 1999
Poslední stav řešení
U - Ukončený projekt
Poslední uvolnění podpory
—
Dodání dat do CEP
Důvěrnost údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Systémové označení dodávky dat
CEP/2000/GA0/GA00GA/U/6:2
Datum dodání záznamu
—
Finance
Celkové uznané náklady
1 906 tis. Kč
Výše podpory ze státního rozpočtu
1 706 tis. Kč
Ostatní veřejné zdroje financování
0 tis. Kč
Neveřejné tuz. a zahr. zdroje finan.
0 tis. Kč
Základní informace
Uznané náklady
1 906 tis. Kč
Statní podpora
1 706 tis. Kč
89%
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
CEP
EE - Mikrobiologie, virologie
Doba řešení
01. 01. 1997 - 01. 01. 1999