Endocytóza hostitelského hemoglobinu ve střevních buňkách klíštěte
Cíle projektu
Klíště Ixodes ricinus tráví krev vnitrobuněčně pomocí cysteinových a aspartových peptidáz, analogii komplexu ploštěnců a nematod. Determinace receptoru hostitelského hemoglobinu ze střev vychází z ultrastrukturálních pozorování a důkazů rozdílného transportu hemoglobinu a ostatních komponent hostitelské krve. Hemoglobinový receptor je podstatný z důvodů toxicity uvolněného hemu při trávení. Cílem je identifikace a charakterizace této molekuly a jejího adaptoru pro clathrinovou endocytózu. Na základě genomových a EST dat budou v tomto projektu určeny kandidátní molekuly, jejichž role bude zkoumána reversně geneticky a pomocí expresních profilů (mRNA, protein) a immunolokalizace. Alternativně budou použity biochemické přístupy afinitní chromatografie a immunoprecipitace s následnou separací a identifikací proteinových komplexů pomocí protilátek a hmotnostní spektrometrie. Získaná data doplněná o RNAi funkční analýzy vytvoří cenný zdroj všeobecných biologických a biochemických informací a mohou být uplatněny při vývoji nových strategií v celosvětovém boji s klíšťaty.
Klíčová slova
tickhemoglobinreceptorendocytosisgutcellsvaccinationAP-2clathrin
Veřejná podpora
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
Program
Postdoktorandské granty
Veřejná soutěž
Postdoktorandské granty 11 (SGA02011GA1PD)
Hlavní účastníci
—
Druh soutěže
VS - Veřejná soutěž
Číslo smlouvy
P502-11-P682
Alternativní jazyk
Název projektu anglicky
Mediated endocytosis of host hemoglobin in tick gut cells
Anotace anglicky
Ixodes ricinus digestion occurs inside the gut cells and is maintained by cysteine and aspartic peptidases analogous to platyhelminths and nematodes. The existence of a hemoglobin receptor on the gut cell surface is supported by ultrastructural studies and different endocytic pathways for serum proteins and hemoglobin. Receptor mediated endocytosis is required due to the toxicity of heme released from hemoglobin. A priority is the identification of the receptor and clathrin adaptor protein complexes. Genomic and EST data reveal candidate molecules that will be tested by reverse genetic approach (expressional profiling, recombinant protein preparation and immunolocalization). Simultaneously the biochemical approach of affinity chromatography and immunoprecipitation will be performed. Separated proteins will be analyzed by immunostaining and mass-spectrometry. Receptor and adaptor, tested by RNAi knock-down phenotyping, present a valuable resource of general biological and biochemical information and should serve as candidates for novel anti-tick strategies.
Vědní obory
Kategorie VaV
ZV - Základní výzkum
CEP - hlavní obor
ED - Fyziologie
CEP - vedlejší obor
EB - Genetika a molekulární biologie
CEP - další vedlejší obor
CE - Biochemie
OECD FORD - odpovídající obory
(dle převodníku)10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)
10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)
10605 - Developmental biology
10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
30101 - Human genetics
30105 - Physiology (including cytology)
Hodnocení dokončeného projektu
Hodnocení poskytovatelem
V - Vynikající výsledky projektu (s mezinárodním významem atd.)
Zhodnocení výsledků projektu
Výsledky ukázaly, že hemoglobin je u klíšťat tráven pomocí specifických proteáz, na čemž se podílí i molekula receptoru IrSRP1. Výsledky významně posunuly současné znalosti o endo-lysozomálním odbourávaní hemoglobinu; byly publikovány ve 3 prestižních č?
Termíny řešení
Zahájení řešení
1. 1. 2011
Ukončení řešení
13. 4. 2015
Poslední stav řešení
U - Ukončený projekt
Poslední uvolnění podpory
12. 6. 2013
Dodání dat do CEP
Důvěrnost údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Systémové označení dodávky dat
CEP16-GA0-GP-U/01:1
Datum dodání záznamu
6. 5. 2016
Finance
Celkové uznané náklady
2 490 tis. Kč
Výše podpory ze státního rozpočtu
2 490 tis. Kč
Ostatní veřejné zdroje financování
0 tis. Kč
Neveřejné tuz. a zahr. zdroje finan.
0 tis. Kč
Základní informace
Uznané náklady
2 490 tis. Kč
Statní podpora
2 490 tis. Kč
100%
Poskytovatel
Grantová agentura České republiky
CEP
ED - Fyziologie
Doba řešení
01. 01. 2011 - 13. 04. 2015