Úloha přenášečů Na/H v buněčné fyziologii kvasinek
Cíle projektu
V kvasince S. cerevisiae je hlavním systémem zprostředkujícím výstup toxických iontů Na z buněk Na-ATPasa, zatímco antiportní přenášeč Na/H se na exportu sodíku v této kvasince podílí jen okrajově. Na druhé straně jsou antiportery Na/H hlavními systémy eliminujícími ionty Na jak v halosensitivních (S. pombe) tak i vysoce halotolerantních (Z. touxii) kvasinkách. Přestože je primární struktura všech tří přenášečů velmi podobná, zdá se, že jejich aktivita, substrátová specifita a úloha v buňkách může být značně rozdílná. Pro charakterizaci vlastností a funkce jednotlivých přenašečů budou geny kódující tyto proteiny klonovány do expresního vektoru, označeny epitopem a exprimovány v kmeni S. cerevisiae postrádajícím vlastní přenašeče. U transformantů bude testována tolerance k iontům alkalických kovů, změnám pH a osmotickému šoku. Biogeneze, buněčná distribude a degradace jednotlivých přenášečů bude sledována pomocí imunofluorescenčních technik.§
Klíčová slova
yeast plasma membraneNa/H antiporteralkali metal cationspotassium homeostasisregulation of cell volumeregulation of intracellular pH
Veřejná podpora
Poskytovatel
Akademie věd České republiky
Program
Granty výrazně badatelského charakteru zaměřené na oblast výzkumu rozvíjeného v současné době zejména v AV ČR
Veřejná soutěž
SAV0-AB2000
Hlavní účastníci
Fyziologický ústav AV ČR, v. v. i.
Druh soutěže
VS - Veřejná soutěž
Číslo smlouvy
—
Alternativní jazyk
Název projektu anglicky
Role of Na/H antiporters in the physiology of yeast cells
Anotace anglicky
In the moderately halotolerant yeast S. cerevisiae, the main transport system for sodium efflux is a Na-ATPase, wheareas the Na/H antiporter seems to be involved in sodium efflux only marginally. On the other hand, Na/H antiporters are the main sodium-eliminating systems in both halosensitive (S.pombe) and halotolerant (Z. rouxii) yeasts. Eventhough the primary structure of all three antiporters is highly similar, their roles and activities are probably different. To elucidate their roles we plan to clone and tag corresponding genes in a auitable vector, and express them in a S. cerevisiae strain lacking its own sodium transport systems. In resulting transformants, the tolerances to (1) alkaline cations, (2) to changes of pH, and (3) to osmotic stresswill be estimated. In order to characterise the cell distribution, biogenesis and degradation of tagged antiporters, they will be expressed in a serie of S. cerevisiae mutant strains, and visualised by immunofluorescence techniques.
Vědní obory
Kategorie VaV
—
CEP - hlavní obor
EB - Genetika a molekulární biologie
CEP - vedlejší obor
EE - Mikrobiologie, virologie
CEP - další vedlejší obor
CE - Biochemie
OECD FORD - odpovídající obory
(dle převodníku)10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)
10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)
10605 - Developmental biology
10606 - Microbiology
10607 - Virology
10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
30101 - Human genetics
Hodnocení dokončeného projektu
Hodnocení poskytovatelem
V - Vynikající výsledky projektu (s mezinárodním významem atd.)
Zhodnocení výsledků projektu
Na/H antiportery nižších eukaryot se podle substrátové specifity a funkce dělí na systémy: 1) s detoxikační úlohou (eliminace nadbytku Na a Li z buněk), 2) se širokou substrátovou specifitou podílející se také na regulaci buněčného objemu a pH.
Termíny řešení
Zahájení řešení
1. 1. 2000
Ukončení řešení
1. 1. 2002
Poslední stav řešení
U - Ukončený projekt
Poslední uvolnění podpory
—
Dodání dat do CEP
Důvěrnost údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Systémové označení dodávky dat
CEP/2003/AV0/AV03IA/U/N/5:3
Datum dodání záznamu
27. 10. 2004
Finance
Celkové uznané náklady
2 443 tis. Kč
Výše podpory ze státního rozpočtu
997 tis. Kč
Ostatní veřejné zdroje financování
1 446 tis. Kč
Neveřejné tuz. a zahr. zdroje finan.
0 tis. Kč
Základní informace
Uznané náklady
2 443 tis. Kč
Statní podpora
997 tis. Kč
40%
Poskytovatel
Akademie věd České republiky
CEP
EB - Genetika a molekulární biologie
Doba řešení
01. 01. 2000 - 01. 01. 2002