Využití chemických strukturních sond a elektroanalytických metod při detekci poškození DNA. Vývoj DNA senzorů.
Cíle projektu
V tomto projektu navrhujeme využít chemických strukturníchsond, ve spojení s biochemickými metodami a s elektrochemickou detekcí, při analýze poškození DNA.Monitorování látek poškozujících DNA v prostředí, spolu s nalýzou poškození buněčné DNA, patří k důležitým krokům při prevenci vážných oenmocnění jako je rakovina. Navrhujeme využít komplexů oxidu osmičelého (Os,L) pro detekci poškození DNA indukovaného různými chemickými a fyzikálními činidly. Adukty DNA s Os,L budou detekovány elektrochemicky nebopomocí enzymové imunoanalýzy s elektrochemickou detekcí. V rámci nového přístupu budou využity magnetické mikročástice jako nosičový povrch pro DNA vystavenou poškozujícím činidlům, nbebo pro zachycení a purifikaci poškozené DNA z reakčních směsí (buněčných lyzátů) před její elektrochemickou analýzou. Pro dosažení co nejlepších signálů budou v současnosti využívané elektrochemické metody vylepšovány a optimalizovány, a budou navrženy jednoduché elektrochemické DNA biosenzory.
Klíčová slova
DNA damage detectionelekctroanalytical methodschemical probes of DNA structuremagnetoseparation techniquesDNA biosensors
Veřejná podpora
Poskytovatel
Akademie věd České republiky
Program
Juniorské badatelské grantové projekty
Veřejná soutěž
Juniorské badatelské grantové projekty 1 (SAV02003-XJ)
Hlavní účastníci
Biofyzikální ústav AV ČR, v. v. i.
Druh soutěže
VS - Veřejná soutěž
Číslo smlouvy
—
Alternativní jazyk
Název projektu anglicky
Applications of chemical structural probes and electroanalytical methods in DNA damage detection. Development of DNA sensors.
Anotace anglicky
In this project we propose to employ chemical probing of DNA structure, in connection with biochemical methods and electrochemical detection, in analysis of DNA damage. Monitoring of DNA-damaging pollutants in the environment, together with analysis of damage to cellular DNA, belong to important steps in prevention of serious diseases such as cancer. We propose to use osmium tetroxide complexes (Os,L) in detection of DNA damage induced by different chemical and physical agents. DNA-Os,L adducts will bedetected electrochemically, or using enzyme-linked immunoassay with electrochemical detection. In a new approach, magnetic beads will be used as carrier surface for DNA exposed to DNA damaging agents and/or to capture and purify damaged DNA from reactionmixtures (cell lysates) for subsequent electrochemical analysis. To gain the best response, currently used elekctrochemical techniques will be improved and optimized, and simple electrochemical DNA biosensors will be designed.
Vědní obory
Kategorie VaV
ZV - Základní výzkum
CEP - hlavní obor
CG - Elektrochemie
CEP - vedlejší obor
CE - Biochemie
CEP - další vedlejší obor
EB - Genetika a molekulární biologie
OECD FORD - odpovídající obory
(dle převodníku)10405 - Electrochemistry (dry cells, batteries, fuel cells, corrosion metals, electrolysis)
10603 - Genetics and heredity (medical genetics to be 3)
10604 - Reproductive biology (medical aspects to be 3)
10605 - Developmental biology
10608 - Biochemistry and molecular biology
10609 - Biochemical research methods
30101 - Human genetics
Hodnocení dokončeného projektu
Hodnocení poskytovatelem
V - Vynikající výsledky projektu (s mezinárodním významem atd.)
Zhodnocení výsledků projektu
Značení komplexem oxidu osmičelého bylo použito při vývoji metody pro stanovení délky trinukleotidových opakování v kombinaci s magnetoseparačnímy metodami a v kombinaci s enzymovým štěpením pro detekci látek poškozujících baze DNA.
Termíny řešení
Zahájení řešení
1. 1. 2003
Ukončení řešení
1. 1. 2005
Poslední stav řešení
U - Ukončený projekt
Poslední uvolnění podpory
—
Dodání dat do CEP
Důvěrnost údajů
S - Úplné a pravdivé údaje o projektu nepodléhají ochraně podle zvláštních právních předpisů
Systémové označení dodávky dat
CEP06-AV0-KJ-U/07:5
Datum dodání záznamu
12. 2. 2014
Finance
Celkové uznané náklady
2 052 tis. Kč
Výše podpory ze státního rozpočtu
1 212 tis. Kč
Ostatní veřejné zdroje financování
0 tis. Kč
Neveřejné tuz. a zahr. zdroje finan.
0 tis. Kč
Základní informace
Uznané náklady
2 052 tis. Kč
Statní podpora
1 212 tis. Kč
59%
Poskytovatel
Akademie věd České republiky
CEP
CG - Elektrochemie
Doba řešení
01. 01. 2003 - 01. 01. 2005